背景^[1-3]

APC anti-human CD19是一類以anti-human CD19為抗原的APC多克隆抗體，可以特異性結(jié)合human CD19，主要用于檢測CD19的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。

CD19檢測以免疫組織化學方法為主，利用抗原抗體發(fā)生特異性結(jié)合的特點，通過特異性標記抗體與CD19抗原結(jié)合，進行孵育并通過染色鏡檢、儀器計數(shù)等方式對標記進行識別，從而達到定性或定量檢測的目的。流式細胞術(shù)可檢測全體B細胞及毛細胞白血病細胞上的CD19，免疫組織染色法可檢測全體B細胞及濾泡樹狀細胞上的CD19。其他方法有免疫熒光染色、免疫金銀染色等。

CD19是分子量為95kDa的糖蛋白，表達于前B細胞和成熟的B細胞膜表面，與B細胞的活化調(diào)節(jié)和發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)，在T細胞和正常的粒細胞上無表達。此抗體主要標記正常B細胞和腫瘤性B細胞。

CD19是參與B細胞活化與增殖的重要膜抗原之一，是所有B細胞共有的表面標志，B細胞活化后不消失，是最重要的B細胞標記因子，同時CD19也是B細胞表面的傳達信號復(fù)合體的構(gòu)成部分，CD19的細胞外部分同其他膜抗原結(jié)合進行信號傳導(dǎo)。

CD19陽性細胞升高見于B淋巴細胞系統(tǒng)的惡性腫瘤，如CD19在95%急性前B淋巴細胞白血病細胞和94%急性成熟B淋巴細胞白血病細胞表達，也見于慢性淋巴細胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等；CD19陽性細胞降低見于體液免疫缺陷病，如無丙種球蛋白血癥、長期使用免疫抑制劑者等。

故CD19檢測可對上述疾病進行明確的病因診斷，并為鑒別診斷提供依據(jù)。此外由于CD19廣泛存在于B淋巴細胞系統(tǒng)惡性腫瘤細胞表面，故可在白血病及淋巴瘤的免疫療法中作為細胞表面的靶點。

應(yīng)用^[4][5]

用于CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Breg在PBC患者外周血中表達及對Th1細胞分化影響的研究

觀察CD19+CD24hiCD38hiBreg在PBC患者外周血中的表達情況。分析該群細胞與疾病的相關(guān)性,并初步探討PBC外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg對輔助性T細胞1(T helper cell 1,Thl)、輔助性T細胞17(T helper cell 17,Th17)細胞分化的影響,為PBC免疫機制的研究及未來治療策略的開發(fā)提供新的實驗依據(jù)。

方法：1.采集PBC患者組與健康對照組(HC)的EDTA抗凝血,密度梯度離心法提取外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),流式細胞儀檢測CD19+B細胞以及CD19+CD24hiCD38hiBreg在CD19+細胞的表達頻率。比較上述兩者在PBC患者與正常人中的變化情況。

2. 采集PBC患者組血清,用Modular PPT生化分析儀檢測患者的ADA、ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、IBIL、TBA等肝功相關(guān)指標,分析其與CD19+CD24hiCD38hiBreg的相關(guān)性。

3. 流式細胞儀檢測HC組中Thl、Th17細胞的頻率,分別與HC組的CD19+CD24hiCD38hiBreg進行相關(guān)性分析,初步分析HC組中Thl、Th17細胞的頻率與CD19+CD24hiCD38hiBreg的潛在關(guān)系。

4.流式細胞儀檢測PBC組中Thl、Th17細胞的頻率,分別與PBC組的CD19+CD24hiCD38hiBreg進行相關(guān)性分析,初步分析PBC組中Th1、Th17細胞的頻率與CD19+CD24hiCD38hiBreg的潛在關(guān)系。

參考文獻

[1]TIM‐1 Signaling Is Required for Maintenance and Induction of Regulatory B Cells[J].M.Y.Yeung,Q.Ding,C.R.Brooks,S.Xiao,C.J.Workman,D.A.A.Vignali,T.Ueno,R.F.Padera,V.K.Kuchroo,N.Najafian,D.M.Rothstein.American Journal of Transplantation.2015(4)

[2]Impaired function of CD 19+CD 24hi CD 38hi regulatory B cells in patients with pemphigus[J].H.‐Q.Zhu,R.‐C.Xu,Y.‐Y.Chen,H.‐J.Yuan,H.Cao,X.‐Q.Zhao,J.Zheng,Y.Wang,M.Pan.Br J Dermatol.2015(1)

[3]Interleukin-10-Producing Plasmablasts Exert Regulatory Function in Autoimmune Inflammation[J].Masanori Matsumoto,Akemi Baba,Takafumi Yokota,Hiroyoshi Nishikawa,Yasuyuki Ohkawa,Hisako Kayama,Axel Kallies,Stephen L.Nutt,Shimon Sakaguchi,Kiyoshi Takeda,Tomohiro Kurosaki,Yoshihiro Baba.Immunity.2014

[4]The diagnosis of primary biliary cirrhosis[J].Christopher L.Bowlus,M.Eric Gershwin.Autoimmunity Reviews.2014(4-5)

[5]吳華仙.CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Breg在PBC患者外周血中表達及對Th1細胞分化影響的研究[D].廣州中醫(yī)藥大學,2016.