背景^[1-3]

APC標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體是一類可以特異性結(jié)合人CD3的小鼠單克隆抗體，主要用于檢測人CD3的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實驗。

檢測原理：雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人CD3水平。用純化的人CD3抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人CD3，再與HRP標(biāo)記的人CD3抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人CD3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人CD3濃度。

在免疫學(xué)中，CD3（分化簇3）T細(xì)胞的共受體是一種蛋白質(zhì)復(fù)合物，它由四個不同的鏈組成。在哺乳動物中，該復(fù)合物含有一個CD3γ鏈，CD3δ鏈，和2 CD3ε鏈。這些鏈具有被稱為一個分子副T細(xì)胞受體（TCR）和ζ-鏈以產(chǎn)生激活信號的T淋巴細(xì)胞。該TCR，ζ鏈和CD3分子一起構(gòu)成的T細(xì)胞受體復(fù)合物。

APC基因是一個很大的管家基因（housekeeping gene）,全長含有一個8538 bp的開放式可讀框架，共15個外顯子，6個可變地表達(dá).其中第15外顯子獨自含有6571個bp，組成77%的編碼區(qū)，是人類已知的外顯子，它共編碼2843個氨基酸.轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA分子為8.9 kb,在很多細(xì)胞和組織中均有表達(dá).。

應(yīng)用^[4][5]

用于CD3、Ki-67和Bcl-2在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義研究

對CD3、Ki-67和Bcl-2在不同宮頸組織中的表達(dá)以及三者與宮頸癌臨床病理特征之間關(guān)系的研究,探討三者在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及意義,為宮頸癌的診斷及分子靶向治療提供理論依據(jù)。方法:1.收集病理確診的不同宮頸組織標(biāo)本118例(正常宮頸組織27例、CIN I組織12例、CIN II-III組織28例、宮頸癌組織51例)。

2. 入選標(biāo)本患者術(shù)前均未接受放化療及生物學(xué)治療,無合并免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病。

3. 采用免疫組化法檢測正常宮頸組織、CIN I組織、CIN II-III組織及宮頸癌組織中CD3、Ki-67和Bcl-2的表達(dá),應(yīng)用SPSS17.0軟件包對所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

結(jié)果:1.CD3陽性表達(dá)率隨宮頸病變加重而下降,在正常宮頸組織、CIN I組織、CIN II-III組織、宮頸癌組織中表達(dá)率為96.3%、75%、57.1%、37.2%,四組間比較,有顯著性差異(P<0.05);其中正常宮頸組織分別與CIN I、CIN II-III、宮頸癌組織比較,有顯著性差異(P<0.05);CIN I與宮頸癌組織比較,有顯著性差異(P<0.05);但CIN II-III與CIN I、宮頸癌組織比較,無顯著性差異(P>0.05)。

CD3陽性表達(dá)率與FIGO分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05),與患者年齡、組織學(xué)類型、病理分級無關(guān)(P>0.05)。

2.Ki-67在正常宮頸組織、CIN I組織、CIN II-III組織和宮頸癌組織中的陽性表達(dá)率依次遞增,分別為3.7%、16.7%、53.6%、86.3%,四組間比較,有顯著性差異(P<0.05);分別進(jìn)行兩兩比較,正常宮頸組織與CIN II-III、宮頸癌組織比較,CIN I與CIN II-III、宮頸癌組織比較,CIN II-III與宮頸癌組織比較,均有顯著性差異(P<0.05);但正常宮頸組織與CIN I組織比較,無顯著性差異(P>0.05)。

參考文獻(xiàn)

[1]Afatinib inhibits proliferation and invasion and promotes apoptosisof the T24 bladder cancer cell line[J].Yunhua Tang,Xiangyang Zhang,Fan Qi,Mingfeng Chen,Yuan Li,Longfei Liu,Wei He,Zhuo Li,Xiongbing Zu.Experimental and Therapeutic Medicine.2015(5)

[2]Diallyl trisulfide-induced apoptosis of bladder cancer cells is caspase-dependent and regulated by PI3K/Akt and JNK pathways[J].Dong Yeok Shin,Gi-Young Kim,Hye Jin Hwang,Wun-Jae Kim,Yung Hyun Choi.Environmental Toxicology and Pharmacology.2014(1)

[3]Predictive ability of estrogen receptor(ER),progesterone receptor(PR),COX-2,Mlh1,and Bcl-2 expressions for regression and relapse of endometrial hyperplasia treated with LNG-IUS:A prospective cohort study[J].Ioannis D.Gallos,James Devey,Raji Ganesan,Janesh K.Gupta.Gynecologic Oncology.2013(1)

[4]A Kinase-Independent Function of CDK6 Links the Cell Cycle to Tumor Angiogenesis[J].Karoline Kollmann,Gerwin Heller,Christine Schneckenleithner,Wolfgang Warsch,Ruth Scheicher,Rene G.Ott,Markus Sch?fer,Sabine Fajmann,Michaela Schlederer,Ana-Iris Schiefer,Ursula Reichart,Matthias Mayerhofer,Christoph Hoeller,Sabine Z?chbauer-Müller,Dontscho Kerjaschki,Christoph Bock,Lukas Kenner,Gerald Hoefler,Michael Freissmuth,Anthony R.Green,Richard Moriggl,Meinrad Busslinger,Marcos Malumbres,Veronika Sexl.Cancer Cell.2013(2)

[5]黃維.CD3、Ki-67和Bcl-2在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義[D].甘肅中醫(yī)藥大學(xué),2016.