背景[1-3]
ANTI-CD86抗體是一類可以特異性結合ANTI-CD86的多克隆抗體，主要用于檢測ANTI-CD86的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標本中ANTI-CD86水平。用純化的ANTI-CD86抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ANTI-CD86，再與HRP標記的ANTI-CD86抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANTI-CD86呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中ANTI-CD86濃度。
CD86，別名為B7.2，分子量為80Kd，表達于樹突狀細胞、單核細胞、記憶T淋巴細胞、生發(fā)中心B淋巴細胞、活化B淋巴細胞及活化T淋巴細胞。他屬于免疫球蛋白超家族，其配體是CD28和CD152（CTLA4）。
活化的T淋巴細胞在機體的抗腫瘤、抗感染和自身免疫疾病中發(fā)揮重要作用。T細胞的活化不僅需要T細胞受體（TCR）與抗原肽-MHC復合物作用產(chǎn)生的信號，還需要表達于抗原提呈細胞（APC）表面的B7家族協(xié)同刺激分子與T細胞上的相應受體結合產(chǎn)生的第二信號。
協(xié)同刺激分子與其受體結合產(chǎn)生正性或負性信號。協(xié)同刺激分子CD80和CD86與其受體CD28結合產(chǎn)生正性信號，或與其受體CTLA-4結合提供負性信號，調節(jié)T細胞活性，進而調控機體的免疫反應。協(xié)同刺激分子CD80和CD86表達在APC細胞上，而在多數(shù)的腫瘤組織及細胞中低表達或不表達，從而不能有效的誘導T細胞的活化，引起腫瘤細胞免疫逃逸而促進腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。
應用[4][5]
用于益生菌提取物LFK對變應性鼻炎小鼠模型脾臟組織中CD80和CD86表達的影響研究
對變應性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠模型經(jīng)口途徑分別給予酶裂解的腸球菌FK-23株(lysed Enterococcus faecalis FK-23,LFK),觀測小鼠脾臟內抗原提呈細胞(antigen-presenting cells,APC)表面組織中共刺激分子CD80和CD86的表達改變,評價益生菌對實驗性AR的免疫調節(jié)作用。
方法：共計75只BALB/c小鼠隨機分為三組：①陽性對照組；②LFK干預組；③陰性對照組。采用OVA腹腔注射及鼻部激發(fā)建立小鼠AR模型,陰性對照組小鼠采用生理鹽水代替OVA進行腹腔注射及滴鼻。
用LFK菌液分別對AR小鼠模型進行灌胃,共計3周；陽性和陰性對照組以生理鹽水代替菌液灌胃處理。觀測第21天小鼠搔鼻和噴嚏次數(shù)。第22天殺鼠取材,小鼠脾臟組織用免疫組織化學法檢測APC表面共刺激分子CD80和CD86的表達。并采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測小鼠血清中細胞因子IL-12水平。
結果：第21天小鼠搔鼻和噴嚏次數(shù),陽性對照組及LFK干預組明顯高于陰性對照組(P<0.05),LFK干預組明顯低于陽性對照組(P<0.05)。血清IL-12水平陽性對照組較陰性對照組顯著降低(P<0.001),LFK干預組較陽性對照組顯著升高(P<0.001),但與陰性對照組相比仍明顯降低(P<0.001)。
小鼠脾臟APC表面共刺激分子組織中CD80的表達,陽性對照組明顯低于陰性對照組及LFK干預組(P<0.05),LFK干預組與陰性對照組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；CD86的表達,陽性對照組明顯高于陰性對照組及LFK灌胃干預組(P<0.05),LFK干預組與陰性對照組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
參考文獻
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[5]張清照.益生菌提取物LFK對變應性鼻炎小鼠模型脾臟組織中CD80和CD86表達的影響[D].南京醫(yī)科大學,2014.