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細胞瞬時轉(zhuǎn)染說明

2020/7/22 10:00:42

背景[1]

目前全球越來越多的重組抗原及重組抗體用于醫(yī)療,尤其針對腫瘤、自身免疫病等難治病癥,以及體外診斷試劑。越來越多的高校和企業(yè)開始重視重組蛋白新藥的開發(fā),這就要求能夠快速生產(chǎn)足夠候選蛋白用于臨床前研究,因此能夠快速生產(chǎn)毫克到克級別的重組蛋白瞬時表達體系開始得到廣泛應(yīng)用。

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導(dǎo)入真核細胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中,其應(yīng)用越來越廣泛。

簡介[1]

細胞瞬時轉(zhuǎn)染后外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達,但通常只持續(xù)幾天,多用于啟動子和其他調(diào)控原件的分析。一般來說,細胞瞬時轉(zhuǎn)染方法中超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高,在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)分析結(jié)果,常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫助檢測。

應(yīng)用特性[1]

目的:快速分析

篩選方法:抗生素抗性

表達持續(xù)時間:隨細胞分裂而稀釋至丟失48-72小時 

目的DNA與宿主染色體:未整合

主要參考文獻

[1] 孫靜靜,李桂林,周雷鳴,周偉偉,趙巧輝;哺乳動物細胞瞬時轉(zhuǎn)染技術(shù)研究進展?!吨袊t(yī)藥生物技術(shù)》 2019年03期

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