原理^[1]

細胞轉染是指將外源分子如DNA, RNA等等入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中，其應用越來越廣泛。因為不同的細胞在生理代謝及分裂上均存在差異,因此研究者將外源遺傳物質導入細胞的過程中需要選擇不同的方式。

方法^[1]

目前，將外源物質導入細胞的方法主要分為三大類: 1、脂質體(或是脂質體替代物)轉染; 2、電轉; 3、病毒感染。這三種方法互有優(yōu)劣。脂質體或是脂質體替代物轉染操作簡便,價格低廉，但是對細胞毒性大。而且，有些細胞通過脂質體轉染效率很低;電轉操作方便快捷,但是需要專門]的儀器,對細胞損傷也比較大；病毒感染克服了前兩者的劣勢,感染效率高,對細胞毒性小，但是病毒前期包裝需要大量的時間和精力。

操作流程^[1]

1、轉染試劑的準備

a.將400ul去核酸酶水加入管中，震蕩10秒鐘，溶解脂狀物。

b.震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2、選擇合適的混合比例(1: 1 - 1: 2/脂質體體積: DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。

主要參考文獻

[1] 胡英，金一；陽離子膜融合脂質體的細胞轉染機制及其保護作用?！吨袊帉W雜志》