背景[1-3]
人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定樣品中白三烯D4(LTD4)的水平。向預(yù)先包被了白三烯D4(LTD4)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白三烯D4(LTD4)，溫育；溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗白三烯D4(LTD4)抗體，再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中白三烯D4(LTD4)的濃度呈正相關(guān)。對(duì)于具有多個(gè)表位的抗原而言，雙夾心ELISA（Double SandwichELISA）可應(yīng)用于目標(biāo)抗原或抗體的定量檢測(cè)。而對(duì)于小分子抗原或半抗原，因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的結(jié)合位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定。此時(shí)，可以采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法模式來(lái)檢測(cè)其中靶分子的含量。競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA又叫封閉ELISA，其主要原理是將標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，最后的顯色也愈淺，也就是說(shuō)，最終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負(fù)相關(guān)。
支氣管哮喘(哮喘)時(shí)氣道阻塞的機(jī)制與氣道平滑肌收縮，血管滲漏所致粘膜水腫、粘液分泌增加及以嗜酸細(xì)胞為主導(dǎo)的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等引起的支氣管痙攣有關(guān)，多種炎性介質(zhì)如組胺、白三烯(LTs)、血栓素、前列腺素、血小板激活因子(PAF)、趨化因子、腺苷及緩激肽等，參與上、下氣道的炎癥反應(yīng)。近年來(lái)隨著LTs在哮喘氣道高反應(yīng)性中的作用逐漸被認(rèn)識(shí)，以及LTs受體部位被確認(rèn)，白三烯受體拮抗劑(LTRA)與LTs合成抑制劑在防治哮喘中的地位引起關(guān)注。
應(yīng)用[4][5]
人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT用于炎癥介質(zhì)白三烯D4在慢性乙型肝炎和原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究。
Leukotriene D4(LTD4)在慢性乙型肝炎(CHB)和原發(fā)性肝癌(HCC)患者血清中的表達(dá)水平,并分析其與血清ALT、AST、γ-GT、HBV-DNA和AFP間的相關(guān)性,進(jìn)而探討LTD4在CHB和HCC發(fā)生發(fā)展中的作用。應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)血清中LTD4水平,全自動(dòng)生化儀檢測(cè)ALT、AST、γ-GT水平,化學(xué)發(fā)光儀和基因擴(kuò)增儀分別檢測(cè)AFP和HBV-DNA。結(jié)果:CHB和HCC患者血清LTD4水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01),且其水平在CHB組、HCC合并HBV組、單獨(dú)HCC組及對(duì)照組中逐漸下降。在CHB中,慢性肝炎與重型肝炎比較,LTD4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);且LTD4水平與ALT、AST、γ-GT及HBV-DNA含量間無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。在HCC中,合并HBV組與單獨(dú)HCC組相比,LTD4水平有顯著性差異(P<0.01);分別比較轉(zhuǎn)移組與無(wú)轉(zhuǎn)移組、治療組與未治療組,結(jié)果差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);LTD4水平僅與ALT呈正相關(guān)(P<0.05),而與AST、γ-GT、AFP無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論:LTD4作為重要的炎癥介質(zhì),可能參與了CHB的發(fā)生發(fā)展,并在促進(jìn)CHB向HCC進(jìn)展的過(guò)程中起著一定的作用,而且對(duì)肝癌細(xì)胞自身的腫瘤生物學(xué)產(chǎn)生影響。
參考文獻(xiàn)
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[5]周艷.炎癥介質(zhì)白三烯D4在慢性乙型肝炎和原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用[D].華中科技大學(xué),2011.