背景[1-3]
人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA KIT采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人ANGPTL3單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的ANGPTL3與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人ANGPTL3，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，最后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，ANGPTL3濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中ANGPTL3濃度。
血管生成素樣蛋白3（angiopoietin-like protein 3，angptl 3）是血管生成素和血管生成素樣蛋白家族成員，因其與該家族成員有共同的結(jié)構(gòu)特征而得名，即氨基端與分泌相關(guān)的信號(hào)肽，介導(dǎo)同源寡聚體形成的螺旋樣結(jié)構(gòu)域，一段短的連接肽和羧基端介導(dǎo)配體活性的纖維蛋白原樣結(jié)構(gòu)域.Angptl 3是一種分泌蛋白，其mRNA主要在人、鼠的肝臟表達(dá).目前研究表明angptl 3的生物學(xué)效應(yīng)表現(xiàn)在兩方面:調(diào)節(jié)血管生成和脂質(zhì)代謝.它對(duì)血管生成的誘導(dǎo)作用較弱，而對(duì)脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用較顯著，因而在心血管病領(lǐng)域受到極大關(guān)注。它主要在肝臟中表達(dá)，并具有血管生成素的特征結(jié)構(gòu)，由信號(hào)肽，N末端卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域和C末端纖維蛋白原（FBN）樣結(jié)構(gòu)域組成。血管生成素樣3蛋白中的FBN樣域顯示出結(jié)合α-5/β-3整聯(lián)蛋白，這種結(jié)合誘導(dǎo)了內(nèi)皮細(xì)胞的粘附和遷移。該蛋白也可能在調(diào)節(jié)血管生成中起作用。
應(yīng)用[4][5]
人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA KIT用于血管生成素樣蛋白3（ANGPTL3）與高脂血癥性急性胰腺炎的相關(guān)性研究。
構(gòu)建穩(wěn)定的高脂血癥急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)大鼠模型。80只雄性SD大鼠隨機(jī)被分為四組:正常組(n=20)、HL組(n=20)、SAP組(n=20)、HLAP組(n=20)。自制脂肪乳劑灌胃喂養(yǎng)大鼠2周構(gòu)建HL動(dòng)物模型,3.5%?；悄懰徕c溶逆行胰膽管注射液誘發(fā)急性重癥胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。模型建立后觀察各組大鼠一般情況,6小時(shí)后取各組大鼠血液及胰腺標(biāo)本,測(cè)定大鼠血清甘油三脂、總膽固醇、淀粉酶含量,顯微鏡下對(duì)比觀察大鼠胰腺組織的HE染色病理變化。結(jié)果HL組與HLAP組大鼠血清甘油三脂和膽固醇值較正常組與SAP組升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。?；悄懰徕c注射組大鼠血清淀粉酶量較正常組及HL組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01),HLAP組血清淀粉酶顯著低于SAP組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。SAP組和HLAP組大鼠胰腺組織均出現(xiàn)嚴(yán)重炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、出血、壞死,HLAP組壞死評(píng)分較SAP組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。結(jié)論自制脂肪乳劑灌胃結(jié)合膽胰管逆行注射3.5%牛磺膽酸鈉可成功誘導(dǎo)SD大鼠建立HLAP模型,HL可加重大鼠AP模型胰腺組織的病理?yè)p害。ANGPTL3在HLAP模型中表達(dá)及對(duì)HLAP的影響目的研究血管生成素樣蛋白-3(angiopoietin like protein3,ANGPTL3)與高脂血癥急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)相關(guān)性,并上調(diào)ANGPTL3表達(dá),觀察對(duì)大鼠HLAP的影響。型建立后觀察各組大鼠一般情況,6小時(shí)后取各組大鼠血液、肝臟及胰腺標(biāo)本,測(cè)定大鼠血清甘油三脂、總膽固醇、淀粉酶含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)肝臟Angptl3 m RNA表達(dá)量,ELISA法檢測(cè)大鼠血清ANGPTL3濃度。顯微鏡下對(duì)比觀察大鼠胰腺組織的HE染色病理變化。結(jié)果HL組和HLAP組大鼠肝臟的Angptl3 m RNA表達(dá)量與血清ANGPTL3蛋白濃度均高于正常組和SAP組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
參考文獻(xiàn)
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