背景[1-3]
人尿蛋白(UP)ELISA KIT應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人尿蛋白(UP)水平。用純化的人尿蛋白(UP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人尿蛋白(UP)，再與HRP標(biāo)記的人尿蛋白(UP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人尿蛋白(UP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人尿蛋白(UP)濃度。尿內(nèi)出現(xiàn)蛋白稱為蛋白尿，也即尿蛋白。正常尿液中含少量小分子蛋白，普通尿常規(guī)檢查測(cè)不出，當(dāng)尿中蛋白增加，尿常規(guī)檢查可以測(cè)出即為蛋白尿。蛋白尿是腎臟病的常見表現(xiàn)，全身性疾病亦可出現(xiàn)蛋白尿。
尿蛋白偏高是指尿液中的蛋白質(zhì)含量偏高，蛋白質(zhì)漏進(jìn)尿液從尿道排出來形成了蛋白尿。尿蛋白越高說明腎臟濾過功能越差，這是衡量腎臟功能的重要指標(biāo)。正常情況下，人體尿液里不含蛋白質(zhì)或只含有微量蛋白質(zhì)，但當(dāng)腎臟發(fā)生病變時(shí)，隨血液循環(huán)流動(dòng)的蛋白質(zhì)流經(jīng)腎臟時(shí)，因?yàn)槟I臟濾過功能的降低而使蛋白質(zhì)“漏網(wǎng)”。尿蛋白偏高的原因考慮最多的應(yīng)該是腎病，因?yàn)槟I病最容易導(dǎo)致尿蛋白。正常的情況下，蛋白都會(huì)回吸收的，如果腎臟出現(xiàn)損傷的情況下，根據(jù)腎臟纖維化發(fā)展原則即腎臟纖維化開始啟動(dòng)，腎臟出現(xiàn)回吸收的功能下降，就會(huì)漏出一些蛋白，從而導(dǎo)致尿蛋白的產(chǎn)生，出現(xiàn)尿蛋白偏高。
應(yīng)用[4][5]
人尿蛋白(UP)ELISA KIT用于紫癜性腎炎患兒血清及尿液中骨膜蛋白表達(dá)水平及意義研究。
骨膜蛋白(periostin)與紫癜性腎炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)之間的關(guān)系,以及血清、尿液中骨膜蛋白與肌酐、尿素、胱抑素C、24h尿蛋白定量、人尿微量白蛋白的相關(guān)性,采用ROC曲線評(píng)價(jià)血清、尿液中骨膜蛋白在紫癜性腎炎中價(jià)值,探討血清及尿骨膜蛋白與紫癜性腎炎發(fā)生之間的關(guān)系。采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測(cè)定研究對(duì)象血清及尿液中骨膜蛋白的水平。分別比較HSPN組、HSP組和正常對(duì)照組血清及尿骨膜蛋白的表達(dá)水平,并比較血清及尿骨膜蛋白與臨床常用指標(biāo)的相關(guān)性,采用ROC曲線評(píng)價(jià)骨膜蛋白對(duì)紫癜性腎炎的價(jià)值。
結(jié)果:1.HSPN組、HSP組、正常對(duì)照組血清骨膜蛋白平均濃度分別為(50.02±8.88)pg/ml,(41.68±8.26)pg/ml,(36.99±8.34)pg/ml,三組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=18.081,P<0.001),兩兩之間比較:HSPN組與正常對(duì)照組、HSP組與正常對(duì)照組、HSPN組與HSP組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001、P<0.001、P<0.05)。2.HSPN組、HSP組、正常對(duì)照組尿骨膜蛋白平均濃度分別為(34.94±3.04)pg/ml,(31.75±1.91)pg/ml,(31.00±1.99)pg/ml。尿骨膜蛋白水平在三組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=23.405,P<0.001),兩兩之間比較:HSPN組與正常對(duì)照組、HSPN組與HSP組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001、P<0.001),HSP組與正常對(duì)照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.HSPN組尿骨膜蛋白與24小時(shí)尿蛋白定量(r=0.810,P<0.001)、人尿微量白蛋白呈正相關(guān)(r=0.735,P<0.001),與尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C無相關(guān)性;HSPN組血清骨膜蛋白與人尿微量白蛋白呈正相關(guān)(r=0.396,P=0.030),與24小時(shí)尿蛋白定量、尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C均無相關(guān)性。
參考文獻(xiàn)
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