概述[1][2]
該試劑盒是專門為從各種環(huán)境土壤樣品中提取高純度的RNA而設(shè)計(jì)。試劑盒采用高效的裂解方法及硅膠柱純化方式, 可充分保證土壤樣品中低豐度生物的RNA的獲得,包括革蘭氏陽(yáng)性、陰性細(xì)菌、真菌和一些較大型的微生物。 強(qiáng)效吸附劑可高效去除土壤樣品中的各種抑制因子,如腐殖酸等。純化的土壤RNA純度高,OD260/OD280在1.6-1.9之間,可直接用于RT-PCR、Northern雜交等各種用途。
目前該試劑盒已經(jīng)成功地進(jìn)行了森林土壤,河邊土壤,稻田泥土,草地, 池塘泥土, 竹林土壤,高原土壤等多種土壤的RNA提取。 土壤經(jīng)SDS玻璃珠與腐殖酸吸附劑重懸后,然后經(jīng)酚氯仿抽提去除蛋白質(zhì),腐殖酸等各種雜質(zhì),通過DNA柱去除基因組DNA,調(diào)節(jié)結(jié)合條件后過RNA柱進(jìn)一步純化,最后RNA溶解于DEPC水中。
產(chǎn)品特點(diǎn)[1]
從多種土壤樣品中分離出高質(zhì)量的總RNA;處理各類土壤,包括普通土壤、堆肥和肥料;清除所有殘留的腐殖酸和其他PCR抑制劑;分離所有大小的RNA,包括microRNA,完整試劑盒,包括珠管和腐殖酸去除柱(HAR)。
應(yīng)用舉例[2]
CN201210071924.1公開了一種土壤中H9亞型禽流感病毒分子的檢測(cè)方法,其步驟:A、根據(jù)報(bào)道的登錄號(hào)為JN381629的H9亞型禽流感病毒HA基因序列設(shè)計(jì)引物對(duì);B、待檢土壤樣品的處理:將同一地點(diǎn)不同位置所采的土壤混合,過20目分析篩,去除土壤中的石頭及雜草;C、待檢土壤樣品中RNA的提取,使用土壤RNA提取試劑盒,提取土壤中的總RNA,D、病毒RNA的反轉(zhuǎn)錄,建立病毒RNA反轉(zhuǎn)錄體系;E、巢式PCR擴(kuò)增目的基因:1)建立巢式PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系;2)建立巢式PCR外側(cè)引物擴(kuò)增反應(yīng)溫度;3)建立巢式PCR內(nèi)側(cè)引物擴(kuò)增反應(yīng)溫度:4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析。能快速、準(zhǔn)確地將被檢土壤樣品中的H9亞型禽流感病毒檢測(cè)出來,同時(shí)適用于動(dòng)物H9亞型禽流感病毒感染的檢測(cè)以及環(huán)境中H9亞型禽流感病毒的監(jiān)測(cè)。
主要參考資料
[1] 土壤RNA提取試劑盒產(chǎn)品說明書
[2] CN201210071924.1土壤中H9亞型禽流感病毒分子的檢測(cè)方法