概述[1]
普通的手提或者試劑盒提取的土壤基因組DNA由于常常殘留有PCR的強(qiáng)烈抑制物如腐殖酸、棕黃酸等雜質(zhì)造成實(shí)驗(yàn)失敗;另外,由于采用了劇烈的玻璃珠擊打來破裂菌體,常常造成DNA剪切和降解。超純土壤基因組DNA快速提取試劑盒通過專利配方的腐殖酸和棕黃酸去除試劑配合特殊處理的純化柱,可以程度的去除這些雜質(zhì),同時(shí)加上多次柱漂洗,確保得到的DNA具有極高純度,此外獨(dú)特的抽提和裂解體系可以迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,不需要借助玻璃珠破壁,有效保證了基因組DNA的完整性。
產(chǎn)品特點(diǎn)[1]
1.該配方和純化柱能有效去除腐殖酸等雜質(zhì)。
2.不需要借助玻璃珠破壁,有效保證了基因組DNA的完整性,長(zhǎng)度可達(dá)30kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各種酶切反應(yīng)。
3.兼容性強(qiáng),適用于各種不同的土壤包括淤泥等提取困難的土壤。
4.提取純度高,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7~1.9。
注意事項(xiàng)[1]
1.溶液LYS或者抑制物去除液IR低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用,注意不要?jiǎng)×覔u晃,以免產(chǎn)生大量氣泡。
2.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
3.溶液S3和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作時(shí)要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4.洗脫液EB不含有螯合劑EDTA,不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫,但應(yīng)該確保批pH大于7.5pH過低影響洗脫效率。用水洗脫DNA應(yīng)該保存在-20℃。DNA如果需要長(zhǎng)期保存,可以用TE緩沖液洗脫(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影響下游酶切反應(yīng),使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。
主要參考資料
[1] SoilPure超純土壤基因組DNA快速提取試劑盒(50次)產(chǎn)品說明書