背景[1-2]
小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞。小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞試劑盒提供了的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率高。此外，小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞試劑盒還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。
生理結(jié)構(gòu)[3-6]
小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠肺動(dòng)脈組織，細(xì)胞呈梭形或多角形。該細(xì)胞所表達(dá)的鈣通道表面表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁炎癥反應(yīng)。該細(xì)胞也是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。雖然肺大動(dòng)脈組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞試劑盒中提供的肺大動(dòng)脈組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的肺大動(dòng)脈組織片能使得肺大動(dòng)脈組織中成肺大動(dòng)脈細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成肺大動(dòng)脈細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。
平滑肌細(xì)胞是指構(gòu)成平滑肌組織。平滑肌即無(wú)紋肌的通稱(chēng)，是被視為較橫紋肌原始的一種肌肉。平滑肌除作為無(wú)脊椎動(dòng)物的軀體肌而有廣泛分布外，在脊椎動(dòng)物除心肌之外而大部分內(nèi)臟肌也是由平滑肌組成的。
應(yīng)用[7][8]
用于AS小鼠主動(dòng)脈平滑肌上TRPC1-BK信號(hào)復(fù)合體分子表達(dá)量的變化研究
冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、缺血性腦血管病等缺血性心腦血管疾病已成為嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的流行性非傳染病,而動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）斑塊的發(fā)生和發(fā)展是其重要的病理生理基礎(chǔ)。AS發(fā)生機(jī)制復(fù)雜,在斑塊的形成和發(fā)展過(guò)程中,血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）的遷徙、增殖、表型轉(zhuǎn)換及細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生起到主要作用。因此,研究VSMCs功能在AS斑塊發(fā)生和發(fā)展中的作用對(duì)于防治冠心病具有重要意義。而VSMCs內(nèi)鈣離子(calcium ion,Ca2+)不僅是VSMCs收縮和舒張的主要調(diào)節(jié)因子,而且作為第二信使對(duì)于VSMCs的遷徙、增殖、表型轉(zhuǎn)換及細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生也起到了關(guān)鍵的作用。
瞬時(shí)受體電位通道（Transient receptor potential channel,TRPC）是一類(lèi)非選擇性的陽(yáng)離子通道,為細(xì)胞感受器,包括TRPC1、TRPC2、TRPC3、TRPC4、TRPC5、TRPC6、TRPC7這七種類(lèi)型,而這七種TRPC通道中,最早發(fā)現(xiàn)研究最深入的是TRPC1通道,這種通道在VSMCs上廣泛分布。與經(jīng)典電壓門(mén)控性Ca2+通道不同的是TRPC1通道無(wú)電壓依賴(lài)性。當(dāng)肌漿網(wǎng)內(nèi)Ca2+耗竭時(shí),TRPC1通道開(kāi)放,Ca2+內(nèi)流增加,血管收縮,故TRPC1通道功能主要是參與VSMCs收縮和增生、細(xì)胞凋亡及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。TRPC1通過(guò)調(diào)控Ca2+內(nèi)流影響機(jī)體的生理機(jī)能。
研究表明,多種病理生理狀態(tài)與TRPC通道表達(dá)量增多和減少、通道開(kāi)閉活性異常存在相關(guān)性。使用抑制劑來(lái)抑制TRPC通達(dá)蛋白的表達(dá)或使用特異性TRPC通道的阻滯劑可使細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度降低、血管舒張,目前認(rèn)為,TRPC家族成員是構(gòu)成細(xì)胞膜上鈣池操縱性Ca2+通道和受體操縱性Ca2+通道的分子基礎(chǔ),它作為主要的Ca2+內(nèi)流通道,不僅參與機(jī)體許多生理功能,還與多種病理過(guò)程相關(guān)。
采用動(dòng)脈粥樣硬化組和對(duì)照組小鼠分別10只,處死后分離得到主動(dòng)脈血管平滑肌組織,從組織中提取總RNA及總蛋白,使用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse-transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）、免疫蛋白印記（Western blot）及免疫組化等方法檢測(cè)并比較兩組小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌組織中TRPC1、大電導(dǎo)鈣離子激活鉀通道α亞單位(large conductance Ca2+-activated K+channelαsubunit,BKα)及大電導(dǎo)Ca2+激活鉀通道β1亞單位(large conductance Ca2+-activated K+channelβ1 subunit,BKβ1)亞基m RNA和蛋白表達(dá)量的差異。
參考文獻(xiàn)
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