適用于大量從DH10Bac轉(zhuǎn)化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進(jìn)行轉(zhuǎn)染

桿粒提取試劑盒 Bacmid Extraction Kit 產(chǎn)品貨號：10123 產(chǎn)品規(guī)格：100 次/200 次 產(chǎn)品簡介： 適用于大量從DH10Bac轉(zhuǎn)化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進(jìn)行轉(zhuǎn)染。 產(chǎn)品內(nèi)容: 產(chǎn) 品 名 稱 100 次 200 次 儲 存 條 件 Solution 1 30ml 60ml 2-8℃ Solution 2 30ml 60ml 室 溫 KAC 30ml 60ml 2-8℃ Wash Buffer 50ml 100ml 室 溫 End Solution 4ml 8ml 2-8℃ 操作步驟： 1. 5ml 離心管 12000rpm 離心 1min 收集細(xì)胞。 2. 真空吸干上清，0.3ml 的 Solution 1 重懸沉淀，輕輕地震蕩或上下混勻。 3. 0.3ml 的 Solution 2 輕輕混勻，室溫孵育 5min。注意：懸浮的沉淀應(yīng)該從渾濁到幾乎半透明。 4. 緩慢加入 0.3ml KAC，加入過程中輕輕混勻，冰上放置 5-10min。 5. 12000rpm 離心 10min。 6. 輕輕將上清轉(zhuǎn)移到含有 0.8ml 異丙醇的離心管，不要吸到白色沉淀，顛倒混勻，冰上孵育 5-10min。 7. 室溫 12000rpm 離心 15 min。 8. 小心棄去上清，不要浮起沉淀，加入 0.5ml Wash Buffer，顛倒離心管數(shù)次清洗沉淀。 9. 室溫 12000rpm 離心 5 min。重復(fù) 8 和 9。 10. 輕輕吸棄上清，室溫 5-10 min 干燥沉淀，不要過分干燥。注意：勿使用真空離心選裝蒸發(fā)儀去干燥 DNA。 11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀，為避免剪切，勿機械重懸DNA，讓溶液順管子輕輕流下溶解DNA。 注意事項： 1. 不推薦純化的桿粒 DNA 存在-20℃，因為反復(fù)凍融會剪切 DNA。 2. 分析重組桿粒 DNA（PCR 鑒定重組桿粒 DNA）或轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞。