細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒（超高靈敏型CCK-8試劑盒）

超高靈敏型CCK-8細(xì)胞活力測定試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性相對定量及絕對定量檢測的快速、高靈敏度試劑盒，比傳統(tǒng)的MTT、XTT及CCK-8方法具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的超高靈敏型CCK-8溶液，無須再進(jìn)行任何配制等操作。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外的步驟去溶解反應(yīng)生成物，可用于大批量樣品的高通量檢測。

使用方法：

1. 使用96孔板，細(xì)胞培養(yǎng)和處理完畢。

2. 逐孔加入超高靈敏型CCK-8試劑，每孔100μl培養(yǎng)基中加入10μl超高靈敏型CCK-8試劑。

3. 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育1~4小時(shí)。

4. 于490nm處測定OD值。

5. 結(jié)果分析  將各測試孔的OD值減去對照孔OD值。各平行孔的OD值取平均數(shù)。

細(xì)胞活力% =（加藥細(xì)胞OD-空白OD）/（對照細(xì)胞OD-空白OD）×100%

6. 若使用除96孔外的培養(yǎng)板，試劑用量按照培養(yǎng)基體積等比例增減。

使用注意事項(xiàng)：

1. 試劑加入后需輕輕振搖培養(yǎng)板，使超高靈敏型CCK-8試劑與培養(yǎng)基充分混勻。

2. 試劑加入后培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異。對于貼壁細(xì)胞，加入超高靈敏型CCK-8的培養(yǎng)時(shí)間一般為1~4小時(shí)，但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細(xì)胞種類而定）。與貼壁細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞較難顯色。對于懸浮細(xì)胞，在加入超高靈敏型CCK-8培養(yǎng)1~4小時(shí)后，可先從培養(yǎng)箱中取出，目測染色程度或用酶標(biāo)儀測定。若顯色困難，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時(shí)后再確定。

3. 如果實(shí)驗(yàn)中有還原劑，需要檢查背景的OD值，即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物，然后加入超高靈敏型CCK-8試劑在一定時(shí)間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較（只加超高靈敏型CCK-8試劑），如果OD值明顯偏高，則說明有反應(yīng)。

4. 若細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)生變化，建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入超高靈敏型CCK-8試劑。含有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用。

5. 如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液，建議設(shè)定600nm（或600nm以上）作為參比波長，扣除參比波長的OD值即可。

6. 如果要測定細(xì)胞的具體數(shù)量，需要先做一個標(biāo)準(zhǔn)曲線。

7. 若測得OD值過高，可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或超高靈敏型CCK-8試劑用量。

8. 本試劑盒靈敏度高，相比傳統(tǒng)的CCK-8法及MTT、XTT法，建議起始細(xì)胞加樣數(shù)/培養(yǎng)數(shù)減半或更少，其他實(shí)驗(yàn)條件不變。如用CCK-8法時(shí)需加4000個細(xì)胞培養(yǎng)后檢測，用本試劑盒時(shí)僅需2000個細(xì)胞即可。

9. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，于490nm所測得OD值在0.5~1.5范圍內(nèi)為佳。

試劑包裝：

  100次：1ml×1瓶；   500次：5ml×1瓶；   3,000次：5ml×6瓶；   10,000次：100ml×1瓶；

貯藏條件：

超高靈敏型CCK-8在避光0~5℃的條件下存放一年，測定效果完全不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。

    本產(chǎn)品僅供科研使用，不做其它用途。