增強型細胞活力/毒性檢測試劑盒 （增強型 CCK-8）說明書 增強型 CCK-8 細胞活力測定試劑根據(jù)專有配方配制，同等用量下的靈敏度為傳統(tǒng) CCK-8 試劑 3~5 倍，明顯 高于國內(nèi)某知名品牌產(chǎn)品?？捎糜跈z測細胞活力，可用于細胞增殖和毒性分析，方法簡便而準確。 試劑的優(yōu)點： 1. 結(jié)果準確，重現(xiàn)性好，試劑不影響細胞活力，顯色產(chǎn)物直接溶解于培養(yǎng)液，直接測定 OD 值即可準確反應細 胞活力。 2. 操作省時簡單，試劑即開即用，無需配制；只需一步操作，即可測定。 3. 安全性好，不含放射性同位素和有害有機溶劑，使用安全。 4. 靈敏度高，靈敏度高于 MTT、XTT 及 CCK-8 等方法，同等用量下的靈敏度為傳統(tǒng) CCK-8 試劑 3~5 倍。 使用方法： 1. 使用 96 孔板，細胞培養(yǎng)和處理完畢。 2. 迅速加入增強型 CCK-8 試劑，每孔 100μl 培養(yǎng)基中加入 10μl 增強型 CCK-8 試劑。 3. 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育 1~4 小時。 4. 于 450nm 處測定 OD 值。 5. 結(jié)果分析 將各測試孔的 OD 值減去對照孔或調(diào)零孔 OD 值。各平行孔的 OD 值取平均數(shù)。 細胞活力% =（加藥細胞 OD-空白 OD）/（對照細胞 OD-空白 OD）×100% 6. 若使用 96 孔外的培養(yǎng)板，試劑用量等比例增減。 使用注意事項： 1. 首次使用時，建議先做幾個孔摸索條件，考察接種細胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間。 2. 加入試劑速度要快，以避免試劑殘留和加樣速度不一所致反應時間不同造成的顯色誤差。有條件的情況下， 建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。為避免槍頭上的殘留所帶來的加樣誤差，增強型 CCK-8 試劑可在加樣前用培養(yǎng)基稀釋混勻。 3. 試劑加入后輕輕振搖培養(yǎng)板，使增強型 CCK-8 試劑與培養(yǎng)基充分混勻。 4. 試劑加入后培養(yǎng)時間根據(jù)細胞種類的不同和每孔細胞數(shù)量的多少而異。對于貼壁細胞，加入增強型 CCK-8 的培養(yǎng)時間一般為 1~4 小時，但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細胞種類而定）。與 貼壁細胞相比，懸浮細胞較難顯色。對于懸浮細胞，在加入增強型 CCK-8 培養(yǎng) 1~4 小時后，可先從培養(yǎng)箱 中取出，目測染色程度或用酶標儀測定決定。白細胞較難顯色，因此需要較長的增強型 CCK-8 反應時間或 增加細胞數(shù)量（10 5個細胞/孔）。若顯色困難，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時后再確定。 5. 如果實驗中有還原劑，需要檢查背景的 OD 值，即在不含細胞的培養(yǎng)基中加入藥物，然后加入增強型 CCK-8 試劑在一定時間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進行比較（只加增強型 CCK-8 試劑），如果 OD 值明顯偏高， 則說明有反應。 6. 若細胞培養(yǎng)時間較長導致培養(yǎng)基顏色或 pH 發(fā)生變化，建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入增強型 CCK-8 試劑。含 有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用。 7. 如果樣品為高渾濁度的細胞懸液，建議設定 600nm（或 600nm 以上）作為參比波長，扣除參比波長的 OD 值即可。 8. 如果要測定細胞的具體數(shù)量，需要先做一個標準曲線。 9. 若測得 OD 值過高，可酌減鋪板細胞數(shù)或增強型 CCK-8 試劑用量。 試劑包裝： 100 次：1ml×1 瓶；500 次：5ml×1 瓶；3,000 次：5ml×6 瓶；5,000 次：5ml×10 瓶；10,000 次：100ml×1 瓶。 貯藏條件： 增強型 CCK-8 在避光 0~5℃的條件下可存放一年，測定效果完全不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。反 復凍融會增加背景值，經(jīng)常使用時請于 0~5℃條件下保存。 本產(chǎn)品僅供科研使用，不做其它用途。