抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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Cappuccino蛋白抗體
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英文名稱(chēng)
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Anti-CNO/Cappuccino
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-CNO/Cappuccino
中文名稱(chēng) Cappuccino蛋白抗體
別 名 Cappuccino; Cappuccino homolog (mouse); Cappuccino homolog; FLJ11230; Protein cappuccino; Protein cappuccino homolog; BL1S4_HUMAN; Biogenesis of lysosome-related organelles complex 1 subunit 4; BLOC-1 subunit 4; BLOC1S4; BCAS4L; CNO.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, Guinea Pig, hu, mo, rat, pig, hrs, cow, shp, dog, Gpig
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 27kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CNO/Cappuccino
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是Cappuccino蛋白抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
戊比妥標(biāo)準(zhǔn)品CT ELISA Kit純度:0.996
噻咪唑標(biāo)準(zhǔn)品FGF9 ELISA Kit純度:0.95
沙利度標(biāo)準(zhǔn)品Fibroblast growth factor 6 ELISA Kit純度:0.998
四氫唑啉標(biāo)準(zhǔn)品Fibroblast growth factor 4 ELISA Kit純度:0.996
四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品bFGF ELISA Kit純度:0.999
卡因標(biāo)準(zhǔn)品Thyroid Ab ELISA Kit純度:0.995
素標(biāo)準(zhǔn)品T4 ELISA Kit純度:0.995
Rat matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)規(guī)格:96T/48T111539-200001含量測(cè)定薯蕷皂苷元規(guī)格:20mg
Rat matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 特價(jià)供應(yīng)規(guī)格:96T/48T111541-200001含量測(cè)定反烯二酸(富馬酸)規(guī)格:20mg
Rat matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T111542-200001鑒別荊芥油規(guī)格:0.2ml
Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T111543-200502鑒別生姜油規(guī)格:0.2ml
Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒特價(jià)促銷(xiāo)規(guī)格:96T/48T111544-200703鑒別莪術(shù)油規(guī)格:0.2ml
Rat 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒特價(jià)供應(yīng)規(guī)格:96T/48T111545-200001鑒別八角茴香油規(guī)格:0.2ml
組織硫化氫含量比色法定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性熒光定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性比色法定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性熒光定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶D1(Phospholipase D1)活性比色法定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶D(Phospholipase D)總活性熒光定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶D(Phospholipase D)總活性比色法定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
組織磷脂酶C(Phospholipase C)活性比色法定量elisa試劑盒 20次 特價(jià)促銷(xiāo)
Cappuccino蛋白抗體 Flavobacterium│chungbukense Lim et al.種屬:Flavobacterium│chungbukense Lim et al.
分離基物:土壤
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長(zhǎng)條件:30
存儲(chǔ)條件:定期移植法黃桿菌屬