抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DKK1
中文名稱 抑癌蛋白DKK1抗體
別 名 Dickkopf 1; Dickkopf 1 like; Dickkopf homolog 1; Dickkopf related protein 1; DKK 1; hDkk 1; hDkk1;DKK-1; SK.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 29kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DKK1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是抑癌蛋白DKK1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
美他環(huán)素英文名稱:Metacycline保存:20℃,避光規(guī)格:100mg環(huán)指蛋白87
青霉英文名稱:Penicillamine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg環(huán)指蛋白44一抗
四環(huán)類雜質(zhì)對照品英文名稱:Tetracyclic impurity reference保存:20℃,避光規(guī)格:50mg環(huán)指蛋白86
利福平英文名稱:Li Fuping保存:20℃,避光規(guī)格:150mg環(huán)指蛋白2一抗
環(huán)孢素英文名稱:Cyclosporine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg環(huán)指蛋白40一抗
頭孢克洛δ3異構(gòu)體英文名稱:Cefaclor Delta 3 isomers保存:20℃,避光規(guī)格:50mg環(huán)指蛋白8一抗
頭孢辛英文名稱:Cefuroxime保存:20℃,避光規(guī)格:100mg細胞衰老抑制基因蛋白一抗
頭孢辛英文名稱:Cefuroxime axetil保存:20℃,避光規(guī)格:200mg中間絲相關(guān)蛋白一抗
舒他西林英文名稱:Sultamicillin保存:20℃,避光規(guī)格:100mgras基因相關(guān)蛋白Rab24一抗
青V英文名稱:Penicillin V保存:20℃,避光規(guī)格:100mg視黃醇脫氫酶10一抗
鹽金英文名稱:Aureomycin hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:200mg核糖核酶6一抗
鹽四環(huán)素英文名稱:Tetracycline hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:200mg化Ras特異性鳥嘌呤核苷釋放因子1
土鱉蟲(冀地鱉)英文名稱:Woodlouse (Hebei Eupolyphaga sinensis)保存:20℃,避光規(guī)格:1g化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1一抗
溪黃草英文名稱:Xihuang Herb保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g化Rho相關(guān)蛋白激酶2一抗
鹿角英文名稱:Antlers保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19一抗
五指毛桃英文名稱:Radix Fici simplicissimae保存:20℃,避光規(guī)格:1g化Rad51一抗
海龍(尖海龍)英文名稱:The Dragon (Jian Hailong)保存:20℃,避光規(guī)格:1g化核糖體S6激酶RSK2一抗
鈣粘附蛋白8抗體Anhydrotuberosin中文名:別名:分子式:C20H16O4
鈣粘蛋白15抗體Isotachioside中文名:別名:分子式:C13H18O8
X染色體開放閱讀框21抗體Shikonofuran A中文名:紫草呋喃A別名:分子式:C18H20O5
9號染色體開放閱讀框153抗體β-Tocopherol中文名:β-生育酚別名:分子式:C28H48O2
4號染色體開放閱讀框19抗體(Z)-3-Hydroxy-5-methoxystilbene中文名:別名:分子式:C15H14O2
抑癌蛋白DKK1抗體 Alternaria brassicicola種屬:Alternaria brassicicola
分離基物:荔枝。采集地:海南省??谑?/span>
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長條件:25℃,好氧
生長特性菌株在25℃,綜合PDA培養(yǎng)下菌落呈質(zhì)地絲絨狀,表面黑褐色。
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法蕓薹生鏈格孢(斜面)