抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱
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原癌基因Bcl-6抗體
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英文名稱
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Anti-Bcl-6/5
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-Bcl-6/5
中文名稱 原癌基因Bcl-6抗體
別 名 B-cell lymphoma 6 protein isoform 1; zinc finger transcription factor BCL6S; B-cell lymphoma 6 protein transcript; BCL-5; BCL-6; Bcl 6; protein LAZ-3; B-cell lymphoma 5 protein; zinc finger and BTB domain-containing protein 27; lymphoma-associated zinc finger gene on chromosome 3; zinc finger protein 51; cys-his2 zinc finger transcription factor; BCL5; BCL6A; LAZ3; ZBTB27; ZNF51; BCL6_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 78kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Bcl-6
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
下列是原癌基因Bcl-6抗體 的相關熱銷產品:
熊果苷(標準品) 英文名稱(EN):Ditertbutyl Dicarbonate (Boc anhydri...規(guī)格(SP):25G
熊果 英文名稱(EN):Urea (≥99.5%)規(guī)格(SP):100G
熊果;烏蘇(標準品) 英文名稱(EN):Urea (For Electrophoresis)規(guī)格(SP):100G
熊去膽(UDCA) 英文名稱(EN):Umbelliferone (99%)規(guī)格(SP):5G
熊去膽(UDCA)標準品 英文名稱(EN):TWEEN 80規(guī)格(SP):100ML
溴吲哚βD半乳糖苷(>98%,BR) 英文名稱(EN):TWEEN 20規(guī)格(SP):100ML
溴吲哚βD半乳糖苷(>98%,BR) 英文名稱(EN):Triton X5規(guī)格(SP):100ML
溴百里藍鈉 英文名稱(EN):Triton X02規(guī)格(SP):500ML
溴百里香藍 英文名稱(EN):Triton X00 (BioXtra grade)規(guī)格(SP):100ML
溴肽林(標準品) 英文名稱(EN):Triton X00 (for electrophoresis)規(guī)格(SP):100ML
溴芬鈉 英文名稱(EN):Triton X00 (for molecular biology)規(guī)格(SP):100ML
溴芬鈉(標準品) 英文名稱(EN):Trichloroacetic acid (TCA, ACS reagent...規(guī)格(SP):100G
溴紅 英文名稱(EN):2Thiobarbituric acid (≥98%, TBA)規(guī)格(SP):25G
溴紅鈉 英文名稱(EN):Taurine (≥99%)規(guī)格(SP):10G
溴藍 英文名稱(EN):Sodium Succinate Dibasic Hexahydrate (...規(guī)格(SP):100G
溴藍鈉 英文名稱(EN):Succinic Acid (≥99.0%)規(guī)格(SP):100G
溴藍鈉 英文名稱(EN):Spermine (≥97%)規(guī)格(SP):1G
溴夫定 英文名稱(EN):AntiIgG (Fc spec.) produced in ...規(guī)格(SP):1ML
生長因子受體結合蛋白2抗體1-Dehydroxybaccatin IV中文名:別名:分子式:C32H44O13
骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體Taxachitriene A中文名:別名:Taxumairol M分子式:C32H44O13
G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體Decinnamoyltaxinine J中文名:別名:分子式:C30H42O11
G蛋白激活內流鉀通道蛋白2抗體Taxezopidine G中文名:別名:分子式:C35H44O9
G蛋白偶聯(lián)受體GPR78蛋白抗體Nagilactone B中文名:別名:分子式:C19H24O7
原癌基因Bcl-6抗體 Enterobacter aerogenes種屬:Enterobacter aerogenes
分離基物:痰液
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:yes
應用領域:模式菌株:。水質檢測,質量控制菌株。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:37℃,好氧。產氣腸桿菌