抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DEK
中文名稱 DEK癌基因結(jié)合蛋白
別 名 D6S231E; Dek; DEK gene; DEK oncogene; DEK oncogene DNA binding; DNA binding; DEK_HUMAN; OTTHUMP00000039357; Protein DEK.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 染色質(zhì)和核信號(hào) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DEK
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是DEK癌基因結(jié)合蛋白 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
鹽艾司洛爾英文名稱:Esmolol hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2一抗
鹽咪達(dá)普利英文名稱:Imidapril hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg相關(guān)抗原57一抗
長春英文名稱:Changchun amine保存:20℃,避光規(guī)格:100mgTIP30蛋白一抗
紫草英文名稱:Purple oxalic acid保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1一抗
紫草素;紫草醌、紫草寧、紫根素;左旋紫草英文名稱:Shikonin; shikonin and shikonin and shikonin shikonin; L保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支乳腺癌抗雌激素抵抗蛋白2一抗
射干苷;鳶尾苷英文名稱:Tectoridin; tectoridin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支胸腺五肽一抗
槲皮苷;榭黃甙;槲皮甙;櫟素;橡皮苷英文名稱:Quercetin; Xie Huang glycoside; quercitrin; quercitrin; rubber glycoside保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白一抗
重樓皂苷I英文名稱:Paris polyphylla saponin I保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白一抗
重樓皂苷II英文名稱:Paris polyphylla saponin II保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白2一抗
重樓皂苷III;薯蕷皂苷英文名稱:Paris polyphylla saponin III; Diosgenin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支胸腺細(xì)胞核蛋白1一抗
重樓皂苷VI英文名稱:Paris polyphylla saponin VI保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支核凋亡因子THAP1一抗
重樓皂苷VII英文名稱:Paris polyphylla saponin VII保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支細(xì)胞毒顆粒相關(guān)蛋白TIA1一抗
鐵冬青;毛冬青英文名稱:Rotundic acid; hairy holly acid保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支腫瘤壞死因子受體超家族成員27一抗
大黃素8OβD葡萄糖苷英文名稱:Emodin 8O beta D glucoside保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支四分子交聯(lián)體14一抗(四旋蛋白)
洋川芎內(nèi)A英文名稱:Senkyunolide A保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7一抗
洋川芎內(nèi)H英文名稱:Senkyunolide H保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支酪蛋白轉(zhuǎn)移酶2一抗
洋川芎內(nèi)I英文名稱:Senkyunolide I保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支Toll樣受體5一抗
鈣激活蛋白酶12抗體Cristacarpin中文名:別名:Erythrabyssin I分子式:C21H22O5
9號(hào)染色體開放閱讀框61抗體6a-Hydroxymedicarpin中文名:別名:分子式:C16H14O5
C末端結(jié)合蛋白2抗體4'-Hydroxy-5,6-dehydrokawain中文名:別名:Noryangonin分子式:C14H12O4
21號(hào)染色體開放閱讀框13抗體6a-Hydroxymaackiain中文名:別名:分子式:C16H12O6
細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Goniodiol diacetate中文名:別名:分子式:C17H18O6
DEK癌基因結(jié)合蛋白 Pediococcusparvulus種屬:Pediococcusparvulus
分離基物:青貯
安全等級:1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:58
生長條件:30℃,厭氧小片球菌