抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白抗體 別 名 Alternative namesApo dystrophin; BMD; CMD3B; DMD; DMD_HUMAN; Duchenne muscular dystrophy protein; DXS142; DXS164; DXS206; DXS230; DXS239; DXS268; DXS269; DXS270; DXS272; Dystrophin; Muscular dystrophy Duchenne and Becker types.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
英文名稱(chēng) Anti-Dystrophin/DMD
中文名稱(chēng) 肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 405kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Dystrophin/DMD
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無(wú)色試劑:內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
蛤油英文名稱(chēng):Toad oil保存:20℃,避光規(guī)格:1g化化絲/蘇激酶p90RSK蛋白一抗
龍膽花英文名稱(chēng):Gentian flowers保存:20℃,避光規(guī)格:0.5gATP依賴(lài)解旋酶RENT1一抗
椿皮英文名稱(chēng):Cortex ailanthi保存:20℃,避光規(guī)格:2g核糖1,5二羧化酶一抗
鐵掃帚英文名稱(chēng):Iron broom保存:20℃,避光規(guī)格:4gRas相關(guān)雌激素調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白
蒲葵子英文名稱(chēng):Pu Kuizi保存:20℃,避光規(guī)格:2gRAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8一抗
廣天仙子英文名稱(chēng):Wide sky Fairy保存:20℃,避光規(guī)格:1g腫瘤抑制基因LUCA15一抗
火炭母英文名稱(chēng):Chinese knotweed保存:20℃,避光規(guī)格:2gRAS蛋白樣激活劑1一抗
九里香英文名稱(chēng):Orange Jessamine保存:20℃,避光規(guī)格:1gRas相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2一抗
板栗殼英文名稱(chēng):Chestnut shell保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g抑癌基因PDLIM4一抗
金果欖英文名稱(chēng):Jin Guolan保存:20℃,避光規(guī)格:0.1gRAS抑制蛋白1一抗
菟絲子(南方菟絲子)英文名稱(chēng):Dodder (Cuscuta australis)保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g食道癌抑制生長(zhǎng)蛋白一抗
臭靈丹英文名稱(chēng):Laggera pterodonta保存:20℃,避光規(guī)格:1gRho家族GTP酶3一抗
山香圓葉英文名稱(chēng):Turpinia leaf保存:20℃,避光規(guī)格:1g環(huán)指蛋白139一抗
山橿根英文名稱(chēng):The root of Lindera reflexa保存:20℃,避光規(guī)格:3gRho GTP酶激活蛋白29一抗
槲葉英文名稱(chēng):Oak leaf保存:20℃,避光規(guī)格:0.4g周期素D相關(guān)蛋白一抗
路邊青英文名稱(chēng):Roadside green保存:20℃,避光規(guī)格:1g視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48一抗
黑螞蟻英文名稱(chēng):The black ant保存:20℃,避光規(guī)格:4g視黃醇脫氫酶11/型肝炎核心蛋白一抗
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框27抗體1-(3,4-Dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)hept-6-en-3-ol中文名:別名:分子式:C19H22O4
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框22抗體Piceatannol 3'-O-glucoside中文名:白皮杉醇 3'-O-葡萄糖苷別名:分子式:C20H22O9
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框14抗體Desoxyrhaponticin中文名:脫氧土大黃苷別名:Deoxyrhaponticin分子式:C21H24O8
磷酸化C端結(jié)合蛋白1抗體Gancaonin I中文名:甘草寧I別名:分子式:C21H22O5
脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體3,8-Di-O-methylellagic acid 2-O-glucoside中文名:別名:3,3'-Di-O-methylellagic acid 4-O-glucoside分子式:C22H20O13
肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白抗體 Aspergillus aculeatus種屬:Aspergillus aculeatus
分離基物:諾尼果
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。
生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧
生長(zhǎng)特性在CPDA斜面上產(chǎn)黑色孢子。5-7天
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法棘孢曲霉