"L-428細(xì)胞:人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:霍奇金淋巴瘤;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細(xì)胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
因為細(xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細(xì)胞,單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團的細(xì)胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細(xì)胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細(xì)胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞
HBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-2細(xì)胞、SKO3細(xì)胞、GM03571細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞
SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞
HEL92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMEC細(xì)胞、MDA157細(xì)胞、GM05372細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma細(xì)胞:細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
McCoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞、CA-46細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞
Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
ST486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞
RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞
BLO11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
CORL23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞
TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
PLB985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞
TK-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、L1210細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T3細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、CA922細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細(xì)胞、RGE細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞
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