"HDLM-2細胞:人霍奇金淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:霍奇金淋巴瘤;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:懸浮
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
我們都知道世界宇宙浩瀚無極,除了我們知道的地球、太陽、月球、銀河系以外還有好多其他宇宙行星,這樣的世界對于很多人來說很陌生稀奇甚至無法想象,這樣的世界同樣也是我們無法觸摸的,然而還有一個微觀的世界也是我們無法接觸的,這個就是——細胞里的微觀世界。對于很多人來說,除了從書本上簡單了解植物細胞的知識以外,在行業(yè)外人的意識里,細胞還是一個讓人一頭霧水的詞語,甚至都是一個無形的存在,更別提描述和看見這個東西,但是對于行業(yè)內(nèi)的生物科學(xué)研究者和醫(yī)學(xué)研究者,這是個經(jīng)常被運用到的必需之物,用宇宙世界的包含于被包含的關(guān)系把細胞的微觀世界剖析開來,讓我們了解到細胞是什么樣的東西及應(yīng)用和未來世界細胞在生命中的重要作用。細胞發(fā)炎——心臟疾??;DNA受損——癌癥;細胞能量衰退——腎功能衰竭、關(guān)節(jié)炎、帕金森氏;老化蛋白堆積——糖尿病、癡呆癥、心腦血管疾病;所有的衰老和疾病都是機體內(nèi)細胞開的損傷、衰老和死亡造成的。所以細胞在科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)研究中有著重要的應(yīng)用作用,尤其是原代細胞,它是從機體組織中分離提取培養(yǎng),它可以作為一種科研材料幫助研究者進行項目研究和課題研究,也可以幫助醫(yī)學(xué)者進行疾病研究和疾病試驗,試想從人體組織中分離培養(yǎng)的細胞經(jīng)過醫(yī)學(xué)藥物的試驗再運用到人體身上,無論從功效還是結(jié)果上效果都是。
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
OCI Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
HPC-Y5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
ARO81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細胞、CX1細胞、AM細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
GM04154B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
CW2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞
L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
MCF7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細胞、Colon26細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、QBC939細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、NCIN87細胞、SW 1271細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、SCH細胞、SUM 190細胞
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