"JM-1細胞：人B淋巴細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：換液２-３次一周
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：懸浮生長 
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準程序：采用細胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
GM05887A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
AE1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
MS751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
Huh-7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
VMM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
3T6 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞
Hs 274.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU.812細胞、HECV細胞、NCIH23細胞
NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
Hut292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
SF-539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、OVCAR-8細胞、LI7細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、Mono Mac 1細胞、A498細胞
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、CMT93細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、U-343細胞、NUGC-4細胞
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