"Daudi細(xì)胞：人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：１９６７年，該細(xì)胞系KleinE和KleinG建系，源于一名１６歲患有Burkitt＇s淋巴瘤的黑人男性，beta-２-微球蛋白陰性，表達(dá)EBNA,VCA，sIg。該細(xì)胞攜帶EB病毒，是一個(gè)典型的B淋巴母細(xì)胞系，可用于白血病發(fā)病機(jī)制的研究。
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時(shí)仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動(dòng)作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時(shí)要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時(shí)以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時(shí)后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時(shí)，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí)，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時(shí)，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時(shí)后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的，大家爭(zhēng)取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況把握）。
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞
CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞
Turbot Embryonic細(xì)胞：細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞
MHCC 97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細(xì)胞、EL-4細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞
CAKI.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞
HL 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細(xì)胞、B-104細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
PLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞
NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞
OSRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
QBI-HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-2細(xì)胞、MN9D細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞
SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2/D1細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
CCK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞
Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
PL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞
WM115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞
MDST8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
GT39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H460細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞
PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞
EO771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH841細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2279細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
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