"Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:1967年,該細(xì)胞系KleinE和KleinG建系,源于一名16歲患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男性,beta-2-微球蛋白陰性,表達(dá)EBNA,VCA,sIg。該細(xì)胞攜帶EB病毒,是一個(gè)典型的B淋巴母細(xì)胞系,可用于白血病發(fā)病機(jī)制的研究。 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞 HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞 NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞 NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞 NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞 SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞 CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞 BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞 DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞 TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞 HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞 293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞 C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞 RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞 Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞 Hs940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞系 CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞 MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞 BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞 H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞 MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞 CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞 HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞 IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞 CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞 JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞 SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞 BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞 H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞 M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞 ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞 KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞 H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞 HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞 SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞 DBTRG-05MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細(xì)胞、HB611細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞 PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞 Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞 SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞 SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞 Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞 HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞 NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞 COLO394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373 MG細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞、RGM1細(xì)胞 X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞 IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞 Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞 WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞 MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞 RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞 KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞 TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞 Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞 LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞 SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞 LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞 Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞 L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞 A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞 BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞 Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞 MDA-MB-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞 EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞 LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞 BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞 D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞 Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞系 293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞 RCC10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞 GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、U373細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞 DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞 "
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