"Farage細胞:人B淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:Farage細胞源于一名患有彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)白人女性的活檢淋巴組織,由HBen-Bassat建系。經IL-4處理,該細胞CD21,CD22,CD54和CD58表達上調,而CD21,CD22,andCD38表達下調。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞生長:懸浮 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 細胞生長特性:懸浮生長 購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流?!炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內;2)吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。 公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系,公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數,為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是……無數次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復返的經費!在細胞生物學,生物化學,免疫學,神經生物學,病理學……只要涉及細胞的研究領域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜,我們就這樣被欺騙了無數次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了??墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經驗中總結出來,當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉染效率顯著降低;細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經被支原體欺凌了! 細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。 184A1細胞系相關產品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞 H9c2 (2-1)細胞系相關產品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞 SK-N-BE(2)-C細胞系相關產品:HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞 BHK 21細胞系相關產品:NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞 P1-Raji細胞系相關產品:RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞 211H細胞系相關產品:Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞 T24(ECV304)細胞系相關產品:Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞 CAL-33細胞系相關產品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞 CAL148細胞系相關產品:Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞 RIN Cl-5F細胞系相關產品:SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞 BT325細胞系相關產品:QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞 LTEP-sm細胞系相關產品:NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞 B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品:SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞 MDA-361細胞系相關產品:MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞 GM03573A細胞系相關產品:Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞 T2(174 x CEM.T2)細胞系相關產品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞 HT-3細胞系相關產品:TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞 MDA-MB-435S細胞系相關產品:Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞 HIEC6細胞系相關產品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞 SUM 190PT細胞系相關產品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞 C12細胞系相關產品:DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞 LLC-MK-2細胞系相關產品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞 CAL 120細胞系相關產品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞 Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞 U-hth74細胞系相關產品:MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞 BE(2)-C細胞系相關產品:NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞 MDA-175細胞系相關產品:Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞 Tj-905細胞系相關產品:GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞 DMS-114細胞系相關產品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞 P31 FUJ細胞系相關產品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞 NCIH2291細胞系相關產品:Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞 Vero-E6細胞系相關產品:LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞 UT7細胞系相關產品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞 WERI-Rb-1細胞系相關產品:HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞 H-2126細胞系相關產品:A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞 SU-DHL-5細胞系相關產品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞 Hs 863.T細胞系相關產品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 COLO-829細胞系相關產品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞 CL1-0細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞 Lu-65細胞系相關產品:LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞 HSC6細胞系相關產品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞 RPMI 8226細胞系相關產品:LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid細胞: No. 18細胞 RBSMC細胞系相關產品:LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞 OCI-Ly03細胞系相關產品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞 SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞 M-O7e細胞系相關產品:HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞 RPMI 6666細胞系相關產品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞 Normal Rat Kidney細胞系相關產品:526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞 CORL88細胞系相關產品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞 BALB/3T3細胞系相關產品:GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞 RL細胞系相關產品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞 NCI-H1668細胞系相關產品:NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞 A2780/CP細胞系相關產品:HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞 MV4II細胞系相關產品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞 Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關產品:ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞 L 132細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞 H-1522細胞系相關產品:KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞 RKN細胞系相關產品:Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞 OCLY8細胞系相關產品:PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞 AG06814-M細胞系相關產品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞 NL20細胞系相關產品:RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞 HSF2細胞系相關產品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞 H35 Reuber細胞系相關產品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞 DMS 114細胞系相關產品:MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞 SK-HEP-1細胞系相關產品:SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞 HD11細胞系相關產品:GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞 PBL細胞系相關產品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞 SK-MEL2細胞系相關產品:COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞 RCC4細胞系相關產品:KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞 P3 NS1 Ag4細胞系相關產品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞 Earle's L cells細胞系相關產品:MGECs細胞、SKBR-3細胞、MDCC MSB1細胞 COR-L 105細胞系相關產品:CHP212細胞、CHL細胞、67NR細胞 SK-N-BE(2)-C細胞系相關產品:HOS (TE85)細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、T47-D細胞 NCI-H929細胞系相關產品:NCIH520細胞、CAKI 2細胞、SW 954細胞 "
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