"PA317細(xì)胞：逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的NIH3T3細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維細(xì)胞；NIH Swiss
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開(kāi)紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專(zhuān)用儀器設(shè)備以及專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專(zhuān)用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類(lèi)似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)。【傳代細(xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞傳代的一般方法：開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬(wàn)單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫(xiě)傳代記錄。
Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞
H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
NL20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞
Hs819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO-007細(xì)胞、H-524細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
HCC1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞
ES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML5細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞
SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細(xì)胞、SW900細(xì)胞、H283細(xì)胞
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞
SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞
LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1954細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細(xì)胞、LS 123細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、H187細(xì)胞
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