1.細胞起源：
細胞簡稱 PA317
細胞別稱 pA317
細胞背景描述 PA317細胞源自TK-NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞，結果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因導入人類，可能因為用于構建PA317細胞而轉入的DNA丟失，能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細胞。選擇后，PA317細胞應在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤，此后PA317細胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個月。
供體年齡 胚胎
組織來源 胚胎
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
細胞類型 轉化細胞系
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液；
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄；
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞；
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液；
6、收集細胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
傳代比例（密度） 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用！以實際收貨產品說明書為準，網站說明書僅供參考。