"Hs 294T細(xì)胞：人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細(xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
P3HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細(xì)胞、REC 1細(xì)胞、KMS11細(xì)胞
P1-Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10RGB細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞
SUM-52-PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞
6T-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞
BC-022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL-4細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
H766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞
Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞
AG 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞
LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞
UPCI-SCC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞
PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞
D 407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞、ECC12細(xì)胞
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
NCI.H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
HCC-2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞
AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly7細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞
WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞
tdott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
MX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、GM03573細(xì)胞
SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、MC26細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細(xì)胞、CMECs細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
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