"Hs 294T Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
HITT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞
IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
NCIH2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
細胞生長特性：貼壁生長
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：混合星狀和多邊形
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
RPMI 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細胞系
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
MCF7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
NTERA2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細胞系
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
Normal Rat Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、KHYG-1細胞、HLE-B3細胞
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