"GAK細胞：人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
SHG-44細胞系相關產(chǎn)品：H4細胞、A253細胞、SF295細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關產(chǎn)品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
TH1細胞系相關產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
SW-839細胞系相關產(chǎn)品：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞
H-441細胞系相關產(chǎn)品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
NCIH2106細胞系相關產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
3396細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
NFS60細胞系相關產(chǎn)品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
OVCA-433細胞系相關產(chǎn)品：HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
SIRC細胞系相關產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
CAMA1細胞系相關產(chǎn)品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
GM00637F細胞系相關產(chǎn)品：TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
CAKI1細胞系相關產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
L-6TG細胞系相關產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
L-6TG細胞系相關產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
Hepa 1-6細胞系相關產(chǎn)品：H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
CL1-5細胞系相關產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
Fao細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
EC-9706細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
MV4-11細胞系相關產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
MHH-CALL2細胞系相關產(chǎn)品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
RSC96細胞系相關產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
TM3細胞系相關產(chǎn)品：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
HSC3細胞系相關產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
H-526細胞系相關產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
OVCAR.4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
HeLa S-3細胞系相關產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
KTA-7細胞系相關產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞
CA 46細胞系相關產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
HRA-19細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關產(chǎn)品：HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
GM-215細胞系相關產(chǎn)品：H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞
Malme-3 M細胞系相關產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
Hs934T細胞系相關產(chǎn)品：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
BPH1細胞系相關產(chǎn)品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
H2172細胞系相關產(chǎn)品：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
KB細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
Neukoplast細胞系相關產(chǎn)品：HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
RPE D407細胞系相關產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
TEV-1細胞系相關產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
H4IIEC3細胞系相關產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
SNU520細胞系相關產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
NCIH1436細胞系相關產(chǎn)品：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
TM-4細胞系相關產(chǎn)品：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
3396細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
NCI-H1299細胞系相關產(chǎn)品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
CMT167細胞系相關產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
ECC-10細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
A-498細胞系相關產(chǎn)品：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
4T1-A細胞系相關產(chǎn)品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
SKN-SH細胞系相關產(chǎn)品：Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關產(chǎn)品：HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
MDA MB 453細胞系相關產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
GDM-1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產(chǎn)品：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
CAMA細胞系相關產(chǎn)品：CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
Caco-2細胞系相關產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
Malme-3 M細胞系相關產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
GM04154B細胞系相關產(chǎn)品：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
EMT-6細胞系相關產(chǎn)品：CTLL2細胞、NS-20Y細胞、KYSE-50細胞
QGP1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H220細胞、HT 1376細胞、SKMel-5細胞
THC-8307細胞系相關產(chǎn)品：LS 123細胞、GM03573細胞、NIH:OVCAR4細胞
Caco-2/BBe細胞系相關產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OVCAR420細胞、IGROV細胞
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