"GAK Adherent人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
GAK Adherent人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細(xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
GAK Adherent人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國(guó)內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
GAK Adherent人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞
DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
A673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN1細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
BNL CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細(xì)胞、COV 434細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞
GAK Adherent人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞
293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞
IMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞
Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞
HRVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細(xì)胞、THP1細(xì)胞、HGC27細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞
Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2029細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞
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