"EC-GI-10細(xì)胞：人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過(guò)２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
alpha TC1 clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemic 1210細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞、H19-7細(xì)胞
IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
NCIH727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞、SW1573細(xì)胞
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE1細(xì)胞、L cell細(xì)胞、LY細(xì)胞
P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
H-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞
HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞
HPC-Y5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131A細(xì)胞、H1694細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞
H-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc813細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
UCLA-SO-M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞
SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
KOPN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
NB1-RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10.G4.1細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞
MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
MFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95-D細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細(xì)胞、C 6細(xì)胞、OC316細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
SK_N_FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC1細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
A2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG1細(xì)胞、Sf21細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞
Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4I細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、HT細(xì)胞
IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞
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