"C2C12細胞：小鼠成肌細胞系
細胞背景資料：該細胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌細胞系的亞株。該細胞分化較快，可形成能收縮的微管，產(chǎn)生特異的肌肉蛋白。在骨形態(tài)形成蛋白（BMP-２）的作用下，該細胞可由成肌細胞分化為成骨細胞。檢測發(fā)現(xiàn)該細胞鼠痘病毒陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
PNT1/A細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
H2342細胞系相關產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
Ly19細胞系相關產(chǎn)品：CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
Caki2細胞系相關產(chǎn)品：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
RPMI 6666細胞系相關產(chǎn)品：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
RMG1細胞系相關產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
BT.549細胞系相關產(chǎn)品：H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
JROECL21細胞系相關產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
AHH1細胞系相關產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
UMUC14細胞系相關產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
Capan 2細胞系相關產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
MGSMC細胞系相關產(chǎn)品：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
KMS-26細胞系相關產(chǎn)品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
CHG5細胞系相關產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
MHCC-LM3細胞系相關產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
MHCC-LM3細胞系相關產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
H184A1細胞系相關產(chǎn)品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
UMUC3細胞系相關產(chǎn)品：JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
J 82細胞系相關產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
HCT-FET細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
SCC9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
Kit225細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
HOP-92細胞系相關產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
C6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
HCC 38細胞系相關產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
HEK-293 c18細胞系相關產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
MDA-MB-231-GFP細胞系相關產(chǎn)品：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞
WTRL1細胞系相關產(chǎn)品：AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
PC 61細胞系相關產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
SK BR 03細胞系相關產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
Panc 02.03細胞系相關產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
COLO 394細胞系相關產(chǎn)品：HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞
SiHa細胞系相關產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
NCI H82細胞系相關產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
MPP89細胞系相關產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
HuTu-80細胞系相關產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
H-1672細胞系相關產(chǎn)品：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
B-104細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
HSF2細胞系相關產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
U-266 AR1細胞系相關產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
DMS153細胞系相關產(chǎn)品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
Tu 177細胞系相關產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
NCI-H2108細胞系相關產(chǎn)品：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
COLO201細胞系相關產(chǎn)品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
NCI-UMC-11細胞系相關產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
293T/17細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
Hs611T細胞系相關產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
IMR90細胞系相關產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
WM 239A細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
T2細胞系相關產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
HSC-I細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
NCIH1915細胞系相關產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
SNUC2A細胞系相關產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
rUCMSCs細胞系相關產(chǎn)品：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
Kit 225 K6細胞系相關產(chǎn)品：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
HEK-293H細胞系相關產(chǎn)品：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
ESC細胞系相關產(chǎn)品：Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
RD 2細胞系相關產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
D341MD細胞系相關產(chǎn)品：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞
Hs729細胞系相關產(chǎn)品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞
Tu 212細胞系相關產(chǎn)品：H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞
H1650細胞系相關產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
NCI-H2081細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
B-CPAP細胞系相關產(chǎn)品：MuM-2C細胞、CFPAC細胞、Hs729T細胞
IMR-32細胞系相關產(chǎn)品：BpRcl細胞、PA I細胞、SK-N-SH細胞
BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品：PA-1細胞、LICR-HN6細胞、SNG-M細胞
H1568細胞系相關產(chǎn)品：JeKo-1細胞、ACT-1細胞、MDA468細胞
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