"C2C12 epithelioid cells小鼠成肌細胞系 細胞背景資料:該細胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌細胞系的亞株。該細胞分化較快,可形成能收縮的微管,產(chǎn)生特異的肌肉蛋白。在骨形態(tài)形成蛋白(BMP-2)的作用下,該細胞可由成肌細胞分化為成骨細胞。檢測發(fā)現(xiàn)該細胞鼠痘病毒陰性。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞 OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞 CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞 細胞生長:貼壁 C2C12 epithelioid cells小鼠成肌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2傳代 3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞 RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞 PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞 Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞 SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 C2C12 epithelioid cells小鼠成肌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;梭形 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞 MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞 HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞 NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞 MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞 RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞 GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞 rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞 C2C12 epithelioid cells小鼠成肌細胞系 CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞 P3.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞 B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞 Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞 BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞 HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞 HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞 SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞 PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞 C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞 H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞 Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞 MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞 MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞 ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞 PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞 HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞 T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞 LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞 HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞 S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞 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HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞 MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞 WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞 NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞 H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞 Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞 alpha-TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞 THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞 COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞 BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞 CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞 C2C12 epithelioid cells小鼠成肌細胞系 EOC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞 mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細胞、APRE-19細胞、Hs819.T細胞 H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS513細胞、MCF-7B細胞、CHOK1細胞 SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、H2106細胞 "
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