"EC9706細胞：人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
P-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞
U251n細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
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BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
Panc 08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
253J-BV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
EC-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
NCI-SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
NCI-H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細胞、HFSF細胞、ANA1細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細胞、SU-DH-L5細胞、6T-CEM細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細胞、SW 403細胞、Hs 695T細胞
SV40-HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、OCM1A細胞、DHL-2細胞
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