"A-431細(xì)胞：人皮膚鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位患有皮膚鱗狀細(xì)胞癌的８５歲女性，是GiardDJ等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。該細(xì)胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克隆；是一個(gè)超三倍體人細(xì)胞株。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊(cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)缓笸ㄟ^(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞
CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、BV-2細(xì)胞、GM03320細(xì)胞
HIT T-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
RPMI-2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-021細(xì)胞、NHLF細(xì)胞、H-1648細(xì)胞
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
Intestinal Epithelioid細(xì)胞： No. 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
HCC1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞
DB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞
HHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、DOK細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
KHYG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞
COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞
IMR-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
PC3-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
OCI-AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
DB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
B16-F10--RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞
FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞
DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor細(xì)胞：-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞
Alexander細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、G401細(xì)胞、ES2細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1184細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
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