"HaCaT細胞：人永生化表皮細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位６２歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關蛋白陽性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內；７)從培養(yǎng)箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
NCIH1688細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
LTEP-sm 1細胞系相關產(chǎn)品：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
SUDHL-16細胞系相關產(chǎn)品：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞
DLM8細胞系相關產(chǎn)品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
EB2細胞系相關產(chǎn)品：CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞
OACP4C細胞系相關產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
MFC細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
H-2591細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
NCI-H2172細胞系相關產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
KYSE0520細胞系相關產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
CCRFCEM細胞系相關產(chǎn)品：MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
UM-UC-1細胞系相關產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
Wien 133細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
MC38細胞系相關產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
OCI-Ly19細胞系相關產(chǎn)品：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
OCI-Ly19細胞系相關產(chǎn)品：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
GM2132細胞系相關產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞
A-172細胞系相關產(chǎn)品：SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
SN12PM6細胞系相關產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
Pa017C細胞系相關產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
BC-028細胞系相關產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
MCMEC細胞系相關產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
HCS2/8細胞系相關產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
BJ1細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
MFM223細胞系相關產(chǎn)品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
SKLU-1細胞系相關產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
Ej138細胞系相關產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
H-596細胞系相關產(chǎn)品：H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞
NCI-H2122細胞系相關產(chǎn)品：R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
H1869細胞系相關產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
BT 549細胞系相關產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
T_T_細胞系相關產(chǎn)品：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
B16-F10--RED細胞系相關產(chǎn)品：3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
S3 HeLa細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
SKMel-28細胞系相關產(chǎn)品：Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞
OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
NT-2細胞系相關產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
FHL 124細胞系相關產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
A 172細胞系相關產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
SW480E細胞系相關產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
HOS-TE85細胞系相關產(chǎn)品：SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
H2198細胞系相關產(chǎn)品：Malme3M細胞、NK10a細胞、TB-1 Lu細胞
HPB-ALL細胞系相關產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
SHEP1細胞系相關產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
MNNG細胞系相關產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
H-1703細胞系相關產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
Walker-256細胞系相關產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
OVISE細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
Walker-256細胞系相關產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
SW 480細胞系相關產(chǎn)品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
Madison細胞系相關產(chǎn)品：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
MCF-10A細胞系相關產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
WM451細胞系相關產(chǎn)品：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
MFE-280細胞系相關產(chǎn)品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
PNT-1A細胞系相關產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
U-251_MG細胞系相關產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
THP 1細胞系相關產(chǎn)品：HUT-226細胞、C2C12細胞、KMS-26細胞
TGW-nu細胞系相關產(chǎn)品：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
CEM-0細胞系相關產(chǎn)品：33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
LAPC-4細胞系相關產(chǎn)品：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
NCL-H548細胞系相關產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
786-O RCC細胞系相關產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
Mo7e細胞系相關產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
HCC1419細胞系相關產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
Ramos (RA)細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
SW-948細胞系相關產(chǎn)品：SW 1573細胞、MDA-MB-361細胞、Cates-1B細胞
NCI-128細胞系相關產(chǎn)品：SL1細胞、Swiss3T3細胞、MUTZ3細胞
SUDHL-16細胞系相關產(chǎn)品：F-81細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、SW-403細胞
LLC-MK2細胞系相關產(chǎn)品：KM12-SM細胞、CA 46細胞、LA4細胞
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