"HaCaT細(xì)胞：人永生化表皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位６２歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長，同時也將細(xì)胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太??；５)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細(xì)胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞
DLM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFH細(xì)胞、U-343細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
MFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞
MC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
H-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-661細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細(xì)胞、SW900細(xì)胞、H283細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
B16-F10--RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
SKMel-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞
NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞
FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
MCF-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
PNT-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞
U-251_MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞、A673細(xì)胞
THP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-226細(xì)胞、C2C12細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
HCC1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
SW-948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、LA4細(xì)胞
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