"A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的８５歲女性，是GiardDJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克??；是一個超三倍體人細胞株。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
細胞生長：貼壁
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２傳代
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
H-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
H-250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
CT-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
MM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
AR4IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
EA. hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
NCI-H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
Kuramochi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
HCT/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞
IM-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
U-CH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
A-431 epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 134VI細胞、293細胞、N-Tera-2細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細胞、Wien 133細胞、SCC 9細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、HBZY 1細胞、B16F0細胞
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