"NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞系
細胞背景資料：腎；成纖維細胞；自發(fā)永生 
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣 
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
U-87-MG細胞系相關產(chǎn)品：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞 
OVCA-432細胞系相關產(chǎn)品：MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞 
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞 
NHRF細胞系相關產(chǎn)品：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞 
IEC18細胞系相關產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞 
Mink Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞 
786-0WT細胞系相關產(chǎn)品：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞 
OVCA 420細胞系相關產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞 
TE353.SK細胞系相關產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞 
KCL22S細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞 
HT144-mel細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞 
SNU761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞 
H-1793細胞系相關產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞 
HEK-293-FT細胞系相關產(chǎn)品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞 
UCH-1細胞系相關產(chǎn)品：RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞 
Caco-2 BBe細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞 
Caco-2 BBe細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞 
MC/9細胞系相關產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞 
Henrietta Lacks cells細胞系相關產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞 
GM02219D細胞系相關產(chǎn)品：RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞 
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞系
SW527細胞系相關產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞 
SU-DH-L5細胞系相關產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 
V-79-4細胞系相關產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞 
KATO 3細胞系相關產(chǎn)品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞 
NCI-H157細胞系相關產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞 
HCT-15細胞系相關產(chǎn)品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞 
RPMI7951細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 
H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞 
Caov-3細胞系相關產(chǎn)品：BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞 
2780細胞系相關產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞 
AtT20細胞系相關產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞 
SAS細胞系相關產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞 
BC-028細胞系相關產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞 
C-28I2細胞系相關產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞 
HCO細胞系相關產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞 
SKN-AS細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞 
ZR751細胞系相關產(chǎn)品：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞 
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞 
H510細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞 
SKRC 39細胞系相關產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞 
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞 
IBMF-7細胞系相關產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞 
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞 
HARA-B細胞系相關產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞 
WM115細胞系相關產(chǎn)品：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞 
GOS-3細胞系相關產(chǎn)品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 
huH 1細胞系相關產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞 
NTera 2細胞系相關產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞 
AML193細胞系相關產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 
TK.10細胞系相關產(chǎn)品：HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞 
Panc 08.13細胞系相關產(chǎn)品：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞 
PA317細胞系相關產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞 
GM3569細胞系相關產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞 
SW-780細胞系相關產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞 
VMM39細胞系相關產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞 
T-ALL1細胞系相關產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞 
OKAC1細胞系相關產(chǎn)品：P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞 
COLO-16細胞系相關產(chǎn)品：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞 
PA-TU S細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞 
Panc 02.03細胞系相關產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞 
130-T細胞系相關產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞 
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞系
NIH:OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞 
A-375SM細胞系相關產(chǎn)品：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞 
CAL 120細胞系相關產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞 
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 
293細胞系相關產(chǎn)品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞 
253J細胞系相關產(chǎn)品：GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 
SNU-761細胞系相關產(chǎn)品：HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞 
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 
MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞 
HCFB（HCF）細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-231細胞、3T6-Swiss albino細胞、BIC-1細胞 
NCIH446細胞系相關產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、SW-403細胞、SKCO-1細胞 
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、EC-109細胞、LS174細胞 
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