"NRK-49F Adherent大鼠正常腎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；成纖維細(xì)胞；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長，此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NRK-49F Adherent大鼠正常腎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
PANC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHAGOK1細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
NRK-49F Adherent大鼠正常腎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹：１)CO２培養(yǎng)箱：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要；２)烘箱(干燥箱)：用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到１６０℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開始，至１００℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長。消毒后不能立即打開箱門，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至１００℃以下后可開門。３)超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。４)液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。５)超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。６)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。７離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞
mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
HuCCT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
NRK-49F Adherent大鼠正常腎成纖維細(xì)胞系
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
GM00637F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞
PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
COLO 679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV4細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞
MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞
RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞
OVCAR8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4 Ig-24細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞、LN229細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞
0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞
REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
QBI-HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-2細(xì)胞、MN9D細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞
16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞
Nb-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、CL40細(xì)胞
SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞
NRK-49F Adherent大鼠正常腎成纖維細(xì)胞系
SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
SACC-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC6細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
CAL 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞
Mhh-Call 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2-293細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、L-6細(xì)胞、RGB細(xì)胞
T 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞
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