"RA-FLSs 類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞背景資料：關(guān)節(jié)；成纖維細胞 
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣 
常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好，預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導抗藥細菌，應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
RA-FLSs 類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
RA-FLSs 類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞 
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞 
SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞 
L-428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞 
HCC70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞 
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 
SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞 
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞 
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞 
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞 
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞 
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞 
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞 
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞 
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞 
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞 
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞 
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞 
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞 
RA-FLSs 類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞 
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞 
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞 
A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞 
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞 
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞 
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞 
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞 
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞 
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞 
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞 
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞 
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞 
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞 
BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞 
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞 
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞 
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞 
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞 
HEK293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞 
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞 
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞 
3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞 
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞 
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞 
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞 
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 
NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞 
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞 
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞 
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞 
RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞 
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞 
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞 
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞 
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞 
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞 
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞 
EC109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞 
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞 
RA-FLSs 類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞系
SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞 
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞 
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞 
Rabbit Kidney 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞 
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞 
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞 
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞 
VK-2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞 
H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞 
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、TCC-PAN2細胞 
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細胞、HUCEC細胞、SW-1783細胞 
Hu-P-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細胞、HUT 226細胞、MHCC 97-H細胞 
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