"RA-FLSs 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：關(guān)節(jié)；成纖維細(xì)胞 
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣 
常見(jiàn)培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時(shí)，有時(shí)即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對(duì)各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好，預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無(wú)對(duì)抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會(huì)使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對(duì)細(xì)胞本身也有一定影響，因此為避免誘導(dǎo)抗藥細(xì)菌，應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無(wú)菌才能使用。同時(shí)，在無(wú)菌過(guò)濾操作中，隨著濾過(guò)體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇最后過(guò)濾的液體進(jìn)行檢測(cè)。定期對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動(dòng)的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過(guò)的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
RA-FLSs 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法5min還不能消化），這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁 
RA-FLSs 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非常肯定地說(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞 
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞 
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞 
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞 
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞 
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞 
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞 
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞 
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞 
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞 
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞 
SHSY-5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-1細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞 
OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞 
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞 
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞 
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞 
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞 
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞 
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞 
RA-FLSs 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞 
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞 
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞 
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞 
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞 
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞 
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞 
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞 
C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞、MDA435細(xì)胞 
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞 
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞 
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞 
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞 
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞 
T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞 
BCaP 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞 
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞 
HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞 
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞 
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞 
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞 
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞 
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞 
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞 
H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞 
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞 
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞 
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞 
NBL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞 
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞 
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞 
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞 
RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞 
Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞 
CHP 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞 
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞 
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞 
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞 
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞 
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞 
HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞 
RA-FLSs 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞系
SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞 
HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞 
EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞 
Rabbit Kidney 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1650細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞、SK-N-BE2C細(xì)胞 
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞 
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞 
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞 
VK-2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞 
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞 
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞 
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞 
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞 
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