"CNE-2Z 人鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：鼻咽癌 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
CNE-2Z 人鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了，老化的會(huì)比較多，對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺(tái)，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁 
CNE-2Z 人鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級(jí)和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級(jí)，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。-２０°C不可超過１小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時(shí)，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
Earles's cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3 H1細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞 
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞 
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞 
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞 
COLO-320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞 
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞 
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞 
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞 
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞 
RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞 
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞 
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞 
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞 
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞 
SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞 
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞 
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞 
Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞 
ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞 
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞 
CNE-2Z 人鼻咽癌細(xì)胞系
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞 
HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞 
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞 
MHCC 97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細(xì)胞、EL-4細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞 
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞 
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞 
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞 
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞 
HEK-293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞 
NCI-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞 
HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞 
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞 
HT 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞、PC-9細(xì)胞 
SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞 
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞 
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞 
N9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KB細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞 
SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞 
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞 
Hep-G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細(xì)胞、FK81細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞 
KHYG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞 
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞 
LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞 
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞 
SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞 
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞 
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞 
AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞 
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞 
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞 
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GMK,BSC-1細(xì)胞、YAC細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞 
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞 
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞 
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞 
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞 
MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞 
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞 
SF-539 BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞 
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞 
HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞 
WPMY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞 
CNE-2Z 人鼻咽癌細(xì)胞系
NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞 
Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞 
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞 
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞 
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞 
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞 
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞 
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞 
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞 
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞、253J細(xì)胞 
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92MI細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞 
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、H23細(xì)胞、NF639細(xì)胞 
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