"CNE-2 Adherent人鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：１９８３年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鱗癌組織；原代細(xì)胞胰蛋白酶消化，４８小時開始生長，首次傳代２０天。裸鼠體內(nèi)移植１００%成瘤。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
HTR-8/SV-neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞
SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞
ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞
MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細(xì)胞系
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞
SNU-739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞、AM-38細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
BHP 10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
HEK 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
C32-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLAG-66細(xì)胞、huH 1細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細(xì)胞系
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
BNL CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞
HCEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞
ST486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
A673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN1細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
SW 1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
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