"CNE-2 Adherent人鼻咽癌細胞系
細胞背景資料：１９８３年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鱗癌組織；原代細胞胰蛋白酶消化，４８小時開始生長，首次傳代２０天。裸鼠體內(nèi)移植１００%成瘤。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞
BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
細胞生長特性：貼壁生長
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞
PVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
SF 767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
HCT-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細胞系
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
AsPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞
T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
HBE 135-E6/E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
MMAc-SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
C4-2 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
C32-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞
MCF7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
D283-MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
CNE-2 Adherent人鼻咽癌細胞系
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
A673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN1細胞、MCA 205細胞、U251-MG細胞
SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細胞、CORL88細胞、HO-8910細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、DMS-153細胞、Metastatic Variant-522細胞
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