"CNE-2 Thawing人鼻咽癌細胞系
細胞背景資料：１９８３年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鱗癌組織；原代細胞胰蛋白酶消化，４８小時開始生長，首次傳代２０天。裸鼠體內(nèi)移植１００%成瘤。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
CNE-2 Thawing人鼻咽癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CNE-2 Thawing人鼻咽癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
MMAc-SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
MM.1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細胞、NCIH1734細胞、MuM-2B細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細胞、WPMY1細胞、NCIH2085細胞
AZ-521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
CHP212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
CNE-2 Thawing人鼻咽癌細胞系
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
P3.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
Hu-P-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞
DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
C 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
NCTC929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
CNE-2 Thawing人鼻咽癌細胞系
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
SKMEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
CEM-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
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