"LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對水的通透性，且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會，從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
HTori:3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞、SCC7細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞
Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞
HS578細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞
S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
hFOB1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細(xì)胞系
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞
AHH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細(xì)胞、DKMG細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
U-373MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞
TE-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4:11細(xì)胞、CHOS細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
Keio University-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞
UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞
SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞
NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
IR 983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細(xì)胞系
NCIH345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
Earles's cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3 H1細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞
MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞
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