"TE-4 Thawing人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
TE-4 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TE-4 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
NCI-H295細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
UO31細胞系相關產(chǎn)品：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
OVCAR.4細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
Mo7e細胞系相關產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
HUASMC細胞系相關產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
Capan 1細胞系相關產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關產(chǎn)品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
LAN5細胞系相關產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
Ketr3細胞系相關產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
CCLP1細胞系相關產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
TOV21細胞系相關產(chǎn)品：H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
TE-12細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關產(chǎn)品：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
no-11細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、K7M2細胞、B16/F10細胞
UCLA SO M14細胞系相關產(chǎn)品：H-220細胞、H2009細胞、NFHIOSE-80細胞
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
SPCA1細胞系相關產(chǎn)品：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
H-211細胞系相關產(chǎn)品：SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
NTera 2/cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞
NTera 2/cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞
HSC-4細胞系相關產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
H2452細胞系相關產(chǎn)品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
Hs 729.T細胞系相關產(chǎn)品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
no.11細胞系相關產(chǎn)品：HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
TE-4 Thawing人食管癌細胞系
IHH-4細胞系相關產(chǎn)品：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
KYSE 510細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
751-NA細胞系相關產(chǎn)品：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
SK-NMC細胞系相關產(chǎn)品：Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
CAMA-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
CPA 47細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
32D-Cl3細胞系相關產(chǎn)品：FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
UMC-11細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
MDA PCa 2b細胞系相關產(chǎn)品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
NEC細胞系相關產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
MZ-CRC-1細胞系相關產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
KPL4細胞系相關產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
751細胞系相關產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
OCM1A細胞系相關產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
LY-R細胞系相關產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
SK.OV.3細胞系相關產(chǎn)品：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
SW 962細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
TNC-1B12B4細胞系相關產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
SKHEP1細胞系相關產(chǎn)品：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
IGROV-1細胞系相關產(chǎn)品：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
KTC1細胞系相關產(chǎn)品：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
Vero細胞系相關產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
H322細胞系相關產(chǎn)品：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
HBL-100細胞系相關產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
SV40-HCEC細胞系相關產(chǎn)品：IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞
MC116細胞系相關產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
NCI-H23細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
HTori-3.1細胞系相關產(chǎn)品：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
TE353.SK細胞系相關產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
OCILY10細胞系相關產(chǎn)品：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
TE-4 Thawing人食管癌細胞系
WILL-2細胞系相關產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
OVCA5細胞系相關產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
751細胞系相關產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
LLCMK2細胞系相關產(chǎn)品：L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
RS(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
H508細胞系相關產(chǎn)品：ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
NCI-SNU-423細胞系相關產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
HME-1細胞系相關產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
HEL-92_1_7細胞系相關產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
OUMS-23細胞系相關產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
H-2347細胞系相關產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
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