"TE-15 Thawing人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
TE-15 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TE-15 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
NCI-H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞
SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細胞、Ketr3細胞、Vero E-6細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372E細胞、Hs 695T細胞、L cells細胞
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
Hs-578-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
TE-15 Thawing人食管癌細胞系
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
HITT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
ACC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
ARO81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
FDCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
BMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
SKNMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
TE-15 Thawing人食管癌細胞系
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
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