"TE-10 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
TE-10 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
TE-10 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
KNS81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
NCI-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞
TE-10 Thawing人食管癌細(xì)胞系
TCMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細(xì)胞、LM1細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
PNT-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞
D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
COR-L23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
Hep 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
HCC1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞
L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞
NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞
Pfeiffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞
hFOB1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞
HIT T-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
TE-10 Thawing人食管癌細(xì)胞系
B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
Ca9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞
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