"TE-10 Thawing人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
TE-10 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TE-10 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥Ｎ艺務(wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
KNS81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、SNU475細胞、HFLS-OA細胞
H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、SKRC20細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
A498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
TE-10 Thawing人食管癌細胞系
TCMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
NCI-H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
SaOS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
COR-L23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
Pfeiffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
hFOB1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞
KG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
TE-10 Thawing人食管癌細胞系
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
SNB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞
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