"C6 Thawing大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料：膠質(zhì)細胞株C６是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆，并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。 當(dāng)細胞從低密度生長到滿瓶時，S-１００產(chǎn)量增加１０倍。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
C6 Thawing大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C6 Thawing大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
CTLL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細胞、Hep3B細胞、H-520細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細胞、Tn-5B1-4細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
Panc-8_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
PANC 813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞
SKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
C6 Thawing大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
HBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343細胞、CX1細胞、AM細胞
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
C6 Thawing大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
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