"C6 Cell:大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:膠質(zhì)細胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導的大鼠膠質(zhì)瘤克隆,并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動物傳代交替后建成的。 當細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產(chǎn)量增加10倍。
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
Mono-Mac-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C6 Cell:大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
細胞生長特性:貼壁生長
C6 Cell:大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
C6 Cell:大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
Adeno 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
SW260細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞
SW260細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞
NCTC 3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
D341MD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
NCI-H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
SUM-149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
C6 Cell:大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細胞、CCC-HHM-2細胞、HLF細胞
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